microRNA-378的细胞间通讯及其对猪生前骨骼肌生长波的调控

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31171192
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    65.0万
  • 负责人：
    唐中林
  • 依托单位：
    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
  • 学科分类：
    C0602.基因表达及非编码序列调控
  • 结题年份：
    2015
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2015-12-31

项目摘要

最近研究发现microRNA可以在细胞间运动，是细胞间通讯一种新的信号分子。申请者前期研究发现microRNA-378在猪血清和出生前的骨骼肌中丰富表达，并在发育过程中呈规律性的波浪式表达，而在出生后表达微弱。本项目拟利用荧光定量PCR、Northern Blot、WesternBlot、细胞转染、过表达、敲低表达、组织切片和扫描电镜、显微注射和体细胞克隆转基因等技术，从分子、细胞和个体水平研究miR-378对骨骼肌生长发育的调控作用，综合荧光素酶报告、降解组测序和miRNA-靶基因表达相关分析等策略，从mRNA和蛋白水平确定miR-378对靶基因及其通路的调节。分离运载microRNA的外泌体（exosome）和Microvesicle（MV），分析miRNA-378的细胞间通讯和信息传递途径。对miRNA编辑与胚胎生长发育进行关联分析，以确定其遗传效应。

结项摘要

本课题通过猪骨骼肌组织miR-seq发现在猪的肌肉组织中特异性高表达的miRNA基因miR-378，通过对小鼠成肌细胞模型中miR-378基因功能的研究我们发现miR-378能促进成肌细胞的分化。随着实验的更深一步研究我们对miR-378与肌肉代谢做了初步探索，发现miR-378参与调节肌肉的代谢。.小鼠miR-378的组织表达谱qPCR结果表明，mmu-miR-378在骨骼肌中的表达量较高；随后依次分离小鼠的腓肠肌、比目鱼肌、胫骨前肌、趾长伸肌和股四头肌，发现富含酵解型肌纤维的胫骨前肌、趾长伸肌和股四头肌组织中miR-378的表达量最为丰富，推测miR-378可能参与酵解型纤维的形成及代谢。首先，通过肌肉组织酸性ATPase酶异染色发现miR-378敲除的小鼠的股四头肌和腓肠肌组织中酵解型纤维所占面积百分比增加，其中腓肠肌组织中增加量极显著（p＜0.001）；并通过生化指标检测发现血清中与肌肉组织糖酵解相关的乳酸脱氢酶、肌酸激酶和肌酸激酶同工酶的含量上升。其次，通过miRNA-靶标mRNA免疫沉淀发现miR-378能显著富集Rora，并对其进行了验证。由于Rora是和基因转录相关转录启动因子和辅因子，故推测miR-378通过调节Rora的翻译进而影响酵解型肌肉组织的形成和代谢。

项目成果

期刊论文数量（17）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Wnt antagonist, secretedfrizzled-related protein is involved in prenatal skeletal muscledevelopment and is a target ofmiRNA-1/206 in pigs
Wnt 拮抗剂、分泌型卷曲相关蛋白参与产前骨骼肌发育，是猪 miRNA-1/206 的靶标
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    BMC Molecular Biology
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Ruiqi Wang;Chuzhao Lei;Rong Zhou;Kui Li
  • 通讯作者：
    Kui Li
Discovery of MicroRNAs associated with myogenesis by deep sequencing of serial developmental skeletal muscles in pigs.
通过对猪连续发育骨骼肌的深度测序发现与肌生成相关的 MicroRNA
  • DOI：
    10.1371/journal.pone.0052123
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    PloS one
  • 影响因子：
    3.7
  • 作者：
    Hou X;Tang Z;Liu H;Wang N;Ju H;Li K
  • 通讯作者：
    Li K
A genome-wide scan for signatures of selection in Chinese indigenous and commercial pig breeds.
对中国本土和商品猪品种的选择特征进行全基因组扫描
  • DOI：
    10.1186/1471-2156-15-7
  • 发表时间：
    2014-01-15
  • 期刊：
    BMC genetics
  • 影响因子：
    2.9
  • 作者：
    Yang S;Li X;Li K;Fan B;Tang Z
  • 通讯作者：
    Tang Z
OLFML3 expression is decreased during prenatal muscle development and regulated by microRNA-155 in pigs.
OLFML3 表达在猪产前肌肉发育过程中下降并受 MicroRNA-155 调节
  • DOI：
    10.7150/ijbs.3821
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    International journal of biological sciences
  • 影响因子：
    9.2
  • 作者：
    Zhao S;Zhang J;Hou X;Zan L;Wang N;Tang Z;Li K
  • 通讯作者：
    Li K
microRNA-155在长白猪和通城猪骨骼肌发育过程中的表达分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    畜牧兽医学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    赵拴平;昝林森;唐中林;李奎
  • 通讯作者：
    李奎

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  • 通讯作者：
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

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本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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