滇杨分枝特性差异的遗传基础研究

主要开展了不同分枝特性滇杨优树的遗传基础AFLP分析；落叶期、休眠期和萌动期3个时期滇杨优树无性系侧芽内源激素（IAA、ZR和ABA）含量的测定；落叶期、休眠期和萌动期3个时期滇杨优树无性系侧芽内差异基因表达谱的cDNA-AFLP分析，并对特异性差异片段进行了克隆、测序和序列比对分析。.（1）不同分枝特性滇杨优树遗传基础的AFLP分析。以大叶杨、北京杨和黑杨为类外群，应用AFLP技术对收集于四川与云南境内的52株滇杨优树遗传基础进行了分析。结果表明，从42对引物组合中筛选出的8对引物组合共扩增产生325条谱带，其中247条为多态性条带，多态性条带百分率为76.0%。利用UPGMA法的聚类分析结果显示，参试的56份材料可分为4组，第I组由52株滇杨优树构成，第II组由大叶杨组成，第III组由北京杨组成，第IV组是黑杨。52株滇杨优树之间，除QXJ030与QXB007外，其余优树均能够区分开，而聚类关系与采集地、滇杨分枝特性等不完全一致。.（2）滇杨优树无性系不同时期侧芽内源激素含量分析。以滇杨优树无性系1a和3a苗木为试材，采用ELISA方法测定了落叶期、休眠期和萌动期侧芽内IAA、ZR和ABA含量。结果表明，1 a扦插苗ABA和IAA含量在3个时期的变化趋势相同，呈逐步上升趋势，而ZR含量在休眠期时达最高，3种激素在不同时期之间均有极显著的差异；3 a扦插苗ABA和IAA含量的变化趋势均是先降后升，在萌动期时达最大，ZR含量呈逐步上升趋势，3种激素含量在不同时期之间的差异均达极显著；2种苗龄扦插苗的ZR/ABA、ZR/IAA和ZR/ABA+IAA比值变化趋势基本相同，均在休眠期时达到最大，极显著地高于落叶期和萌动期。相关性分析结果显示，分枝角与不同时期的内源激素含量及其比值无直接相关性；分枝数量与不同时期的内源激素均呈负相关关系，且在萌动期达到显著水平，与激素在休眠期到萌动期之间的增量及其比值呈负相关关系。.（3）滇杨优树无性系3个时期侧芽基因差异表达谱cDNA-AFLP分析。采用cDNA-AFLP技术，对滇杨优树无性系3个时期侧芽基因差异表达谱进行了分析，筛选出102条差异片段进行克隆、回收、测序，其中得到有效序列14条。比对分析结果表明，2个EST序列与杨树AP2/ERF转录因子同源，其余各差异片段均与杨树已发布预测蛋白编码基因同源，但功能未知。