人精子获能过程中翻译蛋白谱系的构建及受精关键蛋白功能研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30900515
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    20.0万
  • 负责人：
    王蕾
  • 依托单位：
    南京医科大学
  • 学科分类：
    C1101.循环与血液生理
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

受精是一个复杂而严格有序的过程，精子获能是其中的一个关键环节。传统的观点认为精子获能过程中其蛋白质的改变只发生在翻译后修饰水平，但最新的报道显示在精子获能过程中也存在蛋白质翻译过程，由线粒体核糖体介导。蛋白质组学为我们进一步研究这一现象提供了技术保障。本实验室在前期工作中运用二维电泳技术建立了小鼠精子获能过程中翻译蛋白谱，并对其中的一个关键蛋白Mups在小鼠受精过程中的作用进行了深入研究，在此基础上，本课题拟结合二维电泳和iTRAQ两种蛋白质组学技术建立比较完整的人精子获能过程中翻译蛋白谱系，并与国际蛋白质组数据库WORLD-2DPAGE链接，实现全球共享。通过生物信息学分析选取关键蛋白进一步深入研究其在受精过程中的功能，从而进一步阐明受精的分子机制，并且进一步分析临床不育症精液标本的线粒体核糖体状态，为临床不明原因不育症的病因的分子机理及诊断治疗提供理论依据。

结项摘要

精子获能是受精过程中的一个关键环节。传统的观点认为精子获能过程中其蛋白质的改变只发生在翻译后修饰水平，但最新的报道显示在精子获能过程中也存在蛋白质翻译过程，由线粒体核糖体介导。蛋白质组学为我们进一步研究这一现象提供了技术保障。本课题结合运用二维电泳和iTRAQ两种蛋白质组学技术及质谱鉴定的方法鉴定到30个蛋白质表达趋势为获能后升高，CP处理后降低，由此构建了人精子获能过程中翻译蛋白谱系。我们对该蛋白谱中的蛋白功能进行了生物信息学分析，结果显示有相当一部分蛋白与细胞分化、精子功能、胚胎发育等相关，预示这些蛋白参与了受精甚至胚胎发育过程。随机挑选部分蛋白进行验证，结果显示，其表达趋势符合蛋白质组学的结果。我们对其中的一个膜蛋白SLC26A8进行了初步的功能研究，免疫荧光显示其特异性地定位于精子尾部中段与主段交界处，对人精子进行获能培养同时加入SLC26A8抗体可明显降低精子超激活率，说明SLC26A8可能参与了人精子获能过程中的超激活运动。以上研究结果为进一步阐明人精子获能机制提供了更多的线索。

项目成果

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专著数量（0）
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其他文献

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  • 期刊：
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  • 作者：
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    2019
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  • 通讯作者：
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其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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