Laminin/nidogen功能单元调控UBM材料富集BMSCs的机制研究

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项目介绍
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基本信息

  • 批准号：
    81270683
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    70.0万
  • 负责人：
    刘禄斌
  • 依托单位：
    中国人民解放军第三军医大学
  • 学科分类：
    H0409.女性生殖系统损伤与修复
  • 结题年份：
    2016
  • 批准年份：
    2012
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2013-01-01 至2016-12-31

项目摘要

The porcine urinary bladder matrix (UBM) can induce adult stem cell adhere, enrich and differentiate at the transplanting site and replaced by effective tissue without tissue erosion, so it would possible be the idea material for POP reparation surgery, but the mechanism of stem cell enrichment is unclear. We found in our prophase research, the basement of UBM that abundant of laminin/nidogen has enhanced affinity to BMSCs, which is one of the adult stem cell that engaged in tissue reparation, and the cross-link led to decreased affinity for the destruction of laminin's LG domain. considered the new advancement: nidogen is correlate closely to the stem cell adhesion ability of laminin, we introduced the presumption that "laminin/nidogen function unite is the regulation core of stem cell enrichment to UBM", and assumed that it educed enrichment function by positive feedback and space polymerization mechanism. In this study we plan to remove laminin/nidogen firstly from UBM, and combined with different variant type of laminin/nidogen, then observe the adhesion and enrichment of BMSCs on the UBM materials by vitro and vivo. We try to explain this mechanism, and to provide a new theoretical evidence for UBM enhancement and tissue-induced matirials development.
猪脱细胞膀胱基质无侵蚀性，能够诱导成体干细胞向植入部位富集、分化以达到有效组织替代的目的，故有希望成为盆底修复的理想材料。但其干细胞富集机制未明。我们前期发现：富含laminin/nidogen的UBM基底层对参与组织修复的BMSCs具有显著增强的亲和力，交联破坏laminin的LG域会导致这种亲和力的下降，结合最新进展：nidogen与Laminin的干细胞粘附能力密切相关，我们提出"laminin/nidogen功能单元是UBM干细胞富集机制的调控核心"的假说，推测其通过正反馈和空间聚合机制两方面发挥作用。本项目拟建立先经laminin/nidogen去除、再经不同laminin/nidogen及其变异体组合进行孵化的UBM材料，在体内外试验中引导BMSCs向其富集及粘附，以图阐明这一机制，为现有UBM材料的完善以及组织诱导性材料的开发提供理论依据。

结项摘要

本课题的研究背景：本研究前期发现猪脱细胞膀胱基质（UBM）材料具有最适合女性盆底特殊环境的生物特性：优良生物力学性能、抗菌性能、细胞亲和力以及最长的降解周期。在此基础上，进一步发现其基底层少量的Lamin/Nidogen分子可能是其优良细胞相容性的关键因素，在此基础之上，本研究对UBM进行Lamin/Nidogen分子的生物改性，以期获得具有自体诱导性能的组织工程盆底修复材料。.本研究大体分为三个阶段：.一、探讨UBM上的Laminin蛋白对负载BMSCs增殖及向平滑肌细胞分化中的作用研究。应用组织工程学的原理，将P3代BMSCs分别接种到UBM材料、Laminin复合UBM材料以及Anti-Laminin复合UBM材料上，构建三组负载BMSCs的组织工程化盆底修复材料，并通过LDH、CCK8，HE染色、免疫组化检测观察各组负载BMSCs的细胞活性、增殖、迁移以及向平滑肌细胞分化情况。流式细胞仪鉴定BMSCs CD29阳性表达率为98％，CD31阳性表达率为4．56％，CD34阳性率为3．30％。3种材料均能支持BMSCs生长，且随共孵育时间的延长，D(450)值逐渐升高，其中UBM+Laminin复合材料组细胞0(450)最高(P<0．01)。HE染色结果显示UBM+Laminin组细胞接种第3天形成黏附层，并向深部迁移，第14天可达材料致密层；UBM组第7天仅少许细胞向深层迁移，第14天未达基底层；UBM+Anti—Laminin组仅在支架表层生长。免疫组化检测显示UBM+Laminin组、UBM组、UBM+Anti—Laminin组细胞OL．SMA表达分别呈阳性、弱阳性和阴性。结论UBM材料上Laminin蛋白能促进负载BMSCs增殖、迁移、并有诱导其向平滑肌方向分化的作用。明确了UBM材料上Laminin蛋白的功能，对现有UBM材料进行完善，为构建组织诱导型材料的开发提供理论基础。.二、多巴胺表面桥接改性实验的初步研究：由于实验在将Laminin和Nidogen分子合成和固定在UBM材料中遇到技术难题，原有方法不能达到满意的固定，因此课题组在近期其它研究成果上，尝试实验了多巴胺分子材料表面固定技术，通过多巴胺分子在聚丙烯材料表面的修饰，能将脱细胞基质材料牢固固定在聚丙烯材料表面，并且发现明显的改善了聚丙烯材料的生物活性及抗菌性，并且诱导免疫原性向免疫适应方向

项目成果

期刊论文数量（3）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Preparation of a small intestinalsubmucosa modified polypropylene hybrid mesh via a mussel-inspired polydopaminecoating for pelvic reconstruction
通过受贻贝启发的聚多巴胺涂层制备小肠粘膜下层改性聚丙烯混合网用于骨盆重建
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2016
  • 期刊：
    Journal of biomaterials applications
  • 影响因子：
    2.9
  • 作者：
    刘禄斌
  • 通讯作者：
    刘禄斌
Evaluation of the biocompatibility and mechanical properties of xenogeneic (porcine) extracellular matrix (ECM) scaffold for pelvic reconstruction
用于骨盆重建的异种（猪）细胞外基质（ECM）支架的生物相容性和机械性能评估
  • DOI：
    10.1007/s00192-010-1288-9
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    INTERNATIONAL UROGYNECOLOGY JOURNAL
  • 影响因子：
    1.8
  • 作者：
    Wang; Yanzhou;Xu; Huicheng;Ge; Liangpeng;Liang; Zhiqing
  • 通讯作者：
    Zhiqing
Porcine urinary bladder matrix-polypropylene mesh: a novel scaffold material reduces immunorejection in rat pelvic surgery
猪膀胱基质-聚丙烯网：一种新型支架材料可减少大鼠盆腔手术中的免疫排斥
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    International Urogynecology Journal and Pelvic Floor Dysfunction
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Wang; Yanzhou;Ge; Liangpeng;Chen; Yong;Liang; Zhiqing
  • 通讯作者：
    Zhiqing

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其他文献

未足月胎膜早破的临床治疗:终止妊娠还是保胎
  • DOI：
    10.4049/jimmunol.1602033
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中华妇幼临床医学杂志(电子版)
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王雪燕;刘禄斌;漆洪波;冯丽娟;刘菊莲;张华
  • 通讯作者：
    张华
A feminine pelvic floor biocomposite patches and a method for producing
一种女性盆底生物复合补片及其制造方法
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011-07-20
  • 期刊：
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    --
  • 作者：
    刘禄斌;徐惠成;梁志清;王延洲
  • 通讯作者：
    王延洲
盆底重建术中3种骶棘韧带固定术临床效果评价
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  • 发表时间：
    2020
  • 期刊：
    中国实用妇科与产科杂志
  • 影响因子：
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  • 作者：
    孙玉菡;卢深涛;雷 丽;刘禄斌
  • 通讯作者：
    刘禄斌

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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