TRADD基因慢病毒涂层食管支架的构建及其抗支架术后再狭窄的实验研究

项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    81070384
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    32.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    H0315.消化系统疾病研究新技术与新方法
  • 结题年份:
    2013
  • 批准年份:
    2010
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

支架置入术是治疗食管狭窄的主要手段。但支架置入后组织成纤维细胞增生、纤维化、最终导致再次狭窄是影响其疗效的最主要原因。控制两端组织增生是支架治疗成败的关键。前期及其它研究均发现增生性瘢痕成纤维细胞TRADD表达明显减少,导致细胞凋亡率下降,反之,提高TRADD表达可提高TNF介导的细胞凋亡。因此,我们推测将TRADD基因整合进宿主细胞基因组中以提高TRADD表达,可能抑制食管支架造成的食管组织增生,进而减少支架术后再狭窄发生。本课题拟采用氩气刀处理制备食管良性狭窄动物模型,取增生性瘢痕组织培养成纤维细胞,构建TRADD基因慢病毒载体并转染细胞,体外观察TRADD对增生性瘢痕成纤维细胞的选择性介导凋亡作用;采用涂层技术将TRADD慢病毒载体及TNF涂附在食管支架上,将支架置于食管狭窄段,观察支架两端组织增生的抑制效果并探讨其机制。以期为基因抗增生食管支架用于食管良性狭窄治疗提供理论依据。

结项摘要

研究背景:食管支架置入术后再狭窄的发病率高,严重影响了支架的应用,成为临床工作中的难点。再狭窄的主要原因是成纤维细胞的活化与过度增殖,导致肉芽组织增生及纤维化的发生。在细胞凋亡的相关信号通路中,死亡受体介导的信号通路是其主要途径之一。其中,肿瘤坏死因子受体相关死亡域蛋白(TRADD)在TNF-α介导的细胞凋亡信号通路中发挥着重要作用。前期研究发现增生性瘢痕成纤维细胞TRADD表达明显减少,导致细胞凋亡率下降,我们推测通过提高增生性瘢痕成纤维细胞中TRADD的表达量可达到促进其凋亡的作用。研究内容:构建具有生物活性的TRADD基因慢病毒,转染至胚胎成纤维细胞及增生性瘢痕成纤维细胞中,检测其对细胞增殖与凋亡,细胞分裂,I型胶原蛋白分泌的影响。同时,我们以家犬为实验动物,研究APC不同输出功率、氩气流量及作用时间与食管损伤程度之间的关系,探讨食管组织损伤与瘢痕增生及食管狭窄之间的关系,并建立食管良性狭窄动物模型。局部注射TRADD基因慢病毒于动物皮肤瘢痕和食管瘢痕狭窄处,观察瘢痕狭窄情况。采用物理涂层的方法分别将曲安奈德、紫杉醇及TRADD慢病毒涂附在食管支架上,制备曲安奈德、紫杉醇及TRADD慢病毒涂层抗增殖食管支架,将其置于动物食管良性狭窄段,观察其抗食管再狭窄的作用。主要结果:TRADD慢病毒单独及联合10ng/ml TNF-α均能选择性抑制HSFb的增殖,对EFb无抑制作用。TRADD慢病毒引起HSFb G2/M期阻滞,10ng/ml TNF-α可有效促进该阻滞作用的发生,TRADD慢病毒联合10ng/ml TNF-α引起HSFb亚G1凋亡峰的出现,而TRADD慢病毒、10ng/ml TNF-α对EFb细胞周期及凋亡均无明显影响。TRADD基因慢病毒单独及联合10ng/ml TNF-α在24h、48h、72h均可抑制HSFbⅠ型胶原蛋白的分泌,对EFb无抑制作用。实验结果显示氩气流量为2L/min、功率为70W、作用时间为3s时,可成功制备食管良性狭窄动物模型。注射TRADD基因慢病毒于动物皮肤瘢痕和食管瘢痕狭窄处,可长期表达,并有效抑制瘢痕增生。成功制备曲安奈德及紫杉醇涂层抗增殖食管支架,对食管良性狭窄有明显抗增生作用。成功将TRADD基因慢病毒载体涂附在食管支架上,将涂层支架置于动物食管良性狭窄段,TRADD基因可在食管组织中表达,并明显减轻支架两端组织增生。

项目成果

期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(1)
专利数量(0)
氩离子凝固术治疗食管病变的安全性研究
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
    第三军医大学学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    康秀峰;刘培君;袁月;王志中;代剑华;彭贵勇
  • 通讯作者:
    彭贵勇
Plastic tube-assisted gastroscopic removal of embedded esophageal metal stents: A case report
塑料管辅助胃镜取出埋置食管金属支架一例报告
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
    World Journal of Gastroenterology
  • 影响因子:
    4.3
  • 作者:
    Peng Guiyong
  • 通讯作者:
    Peng Guiyong
TRADD慢病毒载体构建及其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
    第三军医大学学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    袁月;康秀峰;牟东;薛世祥;代剑华;彭贵勇
  • 通讯作者:
    彭贵勇
共 3 条
  • 1
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    彭贵勇
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  • 期刊:
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    --
  • 作者:
    于乐泳;代剑华;袁月;彭贵勇
  • 通讯作者:
    彭贵勇
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  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2018
  • 期刊:
    第三军医大学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    贾益君;彭贵勇
  • 通讯作者:
    彭贵勇
共 7 条
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