基于杂交链反应的单分子检测和高通量筛选

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    21175082
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    60.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    B0404.化学与生物传感
  • 结题年份:
    2015
  • 批准年份:
    2011
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2012-01-01 至2015-12-31

项目摘要

本研究主要目的是建立一种杂交链反应(HCR)指数扩增方法。这方面国内外研究很少,且集中在HCR线性扩增,未有系统深入的报道。本项目具体目标如下:首先以DNA分子为研究对象,通过DNA纳米结构设计,利用DNA分子卓越的自组装和识别能力实现精确的从底向上的纳米构筑,实现恒温无酶的指数链式反应,以AFM和落射荧光显微术为技术平台,选择荧光染料或量子点作为荧光标记物,通过核酸杂交、适-配体结合、抗原-抗体结合等多种识别方式触发HCR,进行信号的指数扩增,将该方法扩展应用于蛋白质(抗原等)、DNA等生物分子的单分子计数检测,从而达到对广泛分析物的高选择性、高灵敏性检测。进一步可以对分析物进行荧光波长-荧光强度的编码,为高通量筛选提供平台。

结项摘要

目前,生物样品中蛋白质、生物小分子等测定方法的研究主要集中在如何增加检测方法的灵敏度和提高检测的特异性上。因此,构建高灵敏、高特异性的分析方法对生物样本中蛋白质等的检测具有重要的临床意义。本工作利用HCR信号扩增方法结合单分子检测技术构建了一系列新的、灵敏的蛋白质、生物小分子等定量检测方法。通过核酸杂交、适-配体结合、抗原-抗体结合等多种识别方式触发 HCR,进行信号的扩增,将该方法扩展应用于蛋白质(抗原等)、RNA 、腺苷等生物分子的检测,从而达到对广泛分析物的高选择性、高灵敏性定量。包括基于HCR扩增和单分子计数的方法;基于DNA瓦纳米支架、HCR扩增和单分子计数的方法;指数扩增的放大方法;基于HCR自组装荧光编码的建立。首次将条码策略和单分子计数相结合用于蛋白质的检测,且能够实现复杂样本中两种目标物的同时定量,通过扩大目标物种类和设计相应的识别抗体或适体、H1/H2和荧光探针,亦能实现生物分子的高通量筛选。为早期临床诊断等方面的研究提供了新的方法。本研究的结果,对医学研究等方面有重要的理论和实际意义。上述研究工作已发表SCI收录论文10篇,其中影响因子大于5.0的论文8篇。

项目成果

期刊论文数量(14)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Visual and Quantitative Screening of alpha(1)-Adrenoceptor Antagonists in Living Cells Using Quantum Dots
使用量子点对活细胞中的 α(1)-肾上腺素受体拮抗剂进行目视和定量筛选
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
    ACS Combinatorial Science
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    Hou, Zhun;Song, Yao;Wang, Lei;Guo, Exiang
  • 通讯作者:
    Guo, Exiang
Quantitative detection of tumor necrosis factor-alpha by single molecule counting based on a hybridization chain reaction
基于杂交链式反应的单分子计数定量检测肿瘤坏死因子-α
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
    Biosensors and Bioelectronics
  • 影响因子:
    12.6
  • 作者:
    Feng, Chunjing;Li, Wei;Jiang, Wei;Wang, Lei
  • 通讯作者:
    Wang, Lei
A versatile platform for highly sensitive detection of protein: DNA enriching magnetic nanoparticles based rolling circle ampli?cation immunoassay
用于高灵敏度蛋白质检测的多功能平台:基于 DNA 富集磁性纳米颗粒的滚环放大免疫分析
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
    Chem Comm,
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    Qingwang Xue;Lei Wang;Wei Jiang
  • 通讯作者:
    Wei Jiang
A novel enzyme-free and label-free fluorescence aptasensor for amplified detection of adenosine
一种新型无酶、无标记荧光适体传感器,用于腺苷的放大检测
  • DOI:
    10.1016/j.bios.2012.12.059
  • 发表时间:
    2013-06-15
  • 期刊:
    BIOSENSORS & BIOELECTRONICS
  • 影响因子:
    12.6
  • 作者:
    Fu, Bo;Cao, Jichao;Wang, Lei
  • 通讯作者:
    Wang, Lei
Visualizing the endocytosis of phenylephrine in living cells by quantum dot-based tracking
通过基于量子点的跟踪可视化活细胞中去氧肾上腺素的内吞作用
  • DOI:
    10.1016/j.biomaterials.2014.04.081
  • 发表时间:
    2014-08-01
  • 期刊:
    BIOMATERIALS
  • 影响因子:
    14
  • 作者:
    Ma, Jing;Wu, Lina;Jiang, Wei
  • 通讯作者:
    Jiang, Wei

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  • 通讯作者:
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  • 通讯作者:
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  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
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  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    王亚凤;何瑞杰;颜小捷;王磊;李典鹏;黄永林
  • 通讯作者:
    黄永林

其他文献

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  • 资助金额:
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  • 项目类别:
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AI项目解读示例

课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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