肺鳞癌转移相关蛋白DJ-1促肿瘤转移的分子机制研究

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30972970
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    31.0万
  • 负责人：
    李萃
  • 依托单位：
    中南大学
  • 学科分类：
    H1824.肿瘤大数据与人工智能
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

DJ-1是一种与多种肿瘤相关的瘤基因，在肿瘤的发生发展中发挥着重要的作用。我们的研究不仅发现DJ-1在肺鳞癌淋巴结转移灶中的表达水平较其原发灶明显增高，而且还证实DJ-1在无转移的肺鳞癌组织中的表达较正常支气管上皮组织中增高，但是低于有转移的肺鳞癌原发灶，这强烈提示DJ-1与肺鳞癌的转移密切相关。但DJ-1究竟是通过何种机制促进肺鳞癌转移仍不明确。因此本项目拟在前期研究的基础上一方面系统分析DJ-1的表达水平改变对肺鳞癌恶性生物学特征，特别是对侵袭转移的影响，并寻找DJ-1蛋白与肺鳞癌临床特征之间的关系以阐明DJ-1在肺鳞癌转移中扮演的角色。另一方面通过以串联亲和纯化耦联质谱技术为主的靶向蛋白质组学技术分离、鉴定肺鳞癌细胞中DJ-1 蛋白的相互作用蛋白，发现DJ-1与其相互作用蛋白作用时动态分子网络的改变特征，从而阐明DJ-1的促肺鳞癌转移的分子机理，为肺鳞癌转移的防治研究提供新线索。

结项摘要

DJ-1是一种与多种肿瘤相关的瘤基因，为研究DJ-1基因与肺癌发生发展关系，我们采用RNAi技术稳定干扰SK-MES-1（肺鳞癌细胞株）、HTB-182(肺鳞癌细胞株)、HBE(正常支气管上皮细胞)细胞系中DJ-1的表达建立稳定剔除DJ-1基因的细胞系，采用MTT、平板克隆形成试验、流式细胞分析技术、划痕实验、Transwell侵袭与迁移实验等对其进行生物学特性的分析。制作组织芯片，应用免疫组化检测DJ-1分别在正常支气管上皮组织（20例）、无转移的肺鳞癌组织（30例）、有转移的肺鳞癌原发灶组织及其转移灶的肺鳞癌组织中（30例）、其他类型肺癌组织（20例）的表达情况，并分析DJ-1蛋白与肺鳞癌临床特征之间的关系。构建带有TAP标签的DJ-1质粒，稳定转染肺鳞癌细胞系上调DJ-1的表达，采用串联亲和纯化耦联质谱技术为主的靶向蛋白质组学技术分离、CO-IP鉴定肺鳞癌细胞中DJ-1 蛋白的相互作用蛋白。结果如下：在稳定剔除DJ-1基因的细胞系中，DJ-1 siRNA 干扰组中DJ-1蛋白表达明显低于Control-siRNA组和空白对照组；MTT法结果显示干扰组的细胞增殖速度明显抑制；平板克隆实验结果显示干扰组细胞增殖能力降低；流式细胞术结果显示干扰组G1期和G2期细胞数比例增高，S期细胞比例减少；Tanswell小室迁移实验结果显示干扰组的迁移能力降低（P<0.05）。这些结果提示DJ-1具有促进肿瘤生成和转移、抑制凋亡的作用。免疫组化法结果显示DJ-1在无转移的肺鳞癌组织、有转移的肺鳞癌组织以及其他类型肺癌组织中的表达分别与正常支气管上皮组织中的表达相比均明显增高，而它在有转移的肺鳞癌组织的表达也明显高于无转移的肺鳞癌组织，这表明DJ-1不仅与肺癌的癌变相关，而且在肺鳞癌的转移中发挥着重要的作用。构建带TAP标签质粒，采用脂质体稳定转染细胞株HTB-182、Park7-RNAi-HTB-182、SK-MES-1、Park7-RNAi-SK-MES-1，挑选阳性克隆进行DJ-1相互作用蛋白的筛选。采用串联亲和纯化耦联质谱技术为主的靶向蛋白质组学技术分离鉴定肺鳞癌细胞中DJ-1 蛋白的相互作用蛋白，此实验进行了二次预实验，尚未得到理想结果，实验还在进行中。

项目成果

期刊论文数量（15）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Cancer: A proteomic disease
癌症：一种蛋白质组疾病
  • DOI：
    10.1007/s11427-011-4163-0
  • 发表时间：
    2011-05-01
  • 期刊：
    SCIENCE CHINA-LIFE SCIENCES
  • 影响因子：
    9.1
  • 作者：
    Li GuoQing，Guo Qing;Xiao ZheFeng，Zhefeng;Chen ZhuChu，Zhuchu
  • 通讯作者：
    Chen ZhuChu，Zhuchu
Quantitative proteomic study of human lung squamous carcinoma and normal bronchial epithelial acquired by laser capture microdissection.
激光捕获显微切割获得的人肺鳞癌和正常支气管上皮的定量蛋白质组学研究
  • DOI：
    10.1155/2012/510418
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    Journal of biomedicine & biotechnology
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Xu Y;Cao LQ;Jin LY;Chen ZC;Zeng GQ;Tang CE;Li GQ;Duan CJ;Peng F;Xiao ZQ;Li C
  • 通讯作者：
    Li C
激光捕获显微切割纯化的人正常支气管上皮与肺鳞癌组织的定量蛋白质组学研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    国际病理科学与临床杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    许艳;曾谷清;金龙玉;汤参娥;李萃;肖志强
  • 通讯作者：
    肖志强
Reduced Stathmin-1 Expression in Natural Killer Cells Associated with Spontaneous Abortion
与自然流产相关的自然杀伤细胞中 Stathmin-1 表达减少。
  • DOI：
    10.1016/j.ajpath.2010.10.005
  • 发表时间：
    2011-02-01
  • 期刊：
    AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY
  • 影响因子：
    6
  • 作者：
    Lin, Yi;Li, Cui;Li, Da-Jin
  • 通讯作者：
    Li, Da-Jin
siRNA抑制DJ-1基因表达对肺鳞癌SK-MES-1 细胞生物学行为的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中南大学学报( 医学版)
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    魏旺丽,汤参娥;詹显全;易红;李萃
  • 通讯作者：
    李萃

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  • 发表时间：
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    --
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  • 通讯作者：
    肖志强
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  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李萃;陈主初;廖岚;苏涛;段朝军;汤参娥
  • 通讯作者：
    汤参娥

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喉癌相关基因LCRG1抑瘤作用的分子机理研究
  • 批准号：
    30500558
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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