血清糖胺聚糖作为肿瘤标志物的质谱筛选及其结构鉴定

Glycosaminoglycan (GAG), linear acidic polysaccharides that is widely distributed in human organs, participates in almost all stages including tumorigenesis, metastasis, proliferation, cells apoptosis of several tumors. Recent years, increasing number of reports revealed that the distribution, contents, structures and many important features of GAG varies with the stages of tumor. This makes GAG a potential tumor biomarker..This project will consider serum GAG as the object and will take the advantages of modern hyphenated technique of chromatography and mass spectrometry. Firstly, we are aiming at establishing an efficient and sensitive method for serum GAG isolation, purification and structural identification. Subsequently, we will devote to the investigation of serum GAG from different kinds and stages of tumor and normal samples using this new mothed. At this stage, we will evaluate the contents of total serum GAG and look in-depth into the fine structure including degree of polymerization, sulfation and others of serum GAG sugar chains. Then, based on the information collected from the previous stage, the difference between tumor and normal samples will be investigated. After screening, we will try to select potential biomarkers of tumors and will perform further studies to certificate. .The output of this project will give us a better understanding of the changes of GAG during tumor development from the point of molecules. Moreover, the exploration of tumor biomarker will provide a new idea of early diagnosis of tumor.

糖胺聚糖作为一种在体内广泛分布的线性酸性多糖参与了多种肿瘤的发生、转移、增殖、凋亡等过程，并发挥着许多重要的作用。由于糖胺聚糖的分布、含量、结构等随肿瘤的不同阶段有所变化，使得糖胺聚糖成为潜在的肿瘤标志物。本课题以血清糖胺聚糖为研究对象，借助色谱质谱联用技术，旨在（1）建立快速灵敏的血清糖胺聚糖提取、纯化及结构鉴定的新方法；（2）利用新方法对不同种类和阶段肿瘤样本与正常样本血清糖胺聚糖进行研究，对血清糖胺聚糖的含量与聚合度、硫酸化程度等精细结构信息进行深入分析；（3）对肿瘤与正常样本血清糖胺聚糖进行差异性研究，对潜在的可以作为肿瘤标志物的糖胺聚糖结构进行筛选，并进一步确认。本课题的研究成果将使我们从分子角度更好的认识糖胺聚糖在肿瘤发展过程中的变化，并通过对肿瘤标志物的探索，为肿瘤早期诊断提供新的思路。

糖胺聚糖作为一种在体内广泛分布的线性酸性多糖参与了多种肿瘤的发生、转移、增殖、凋亡等过程，并发挥着许多重要的作用。由于糖胺聚糖的分布、含量、结构等随肿瘤的不同阶段有所变化，即要求建立高效的分析方法，对糖胺聚糖的结构进行全面解析，实现各种糖胺聚糖的对比分析，以期发现潜在标志物。首先建立样品中GAG分离纯化及质谱分析表征的系统方法，对GAG进行完全的提取，保证GAG信息的完整，对前期建立的GAG方法进行优化升级，建立适用于低丰度的GAG分析的串联质谱方法；其次，通过对真实样品的处理和分析，对第一部中建立的提取和质谱方法进行验证并进一步完善，对GAG进行提取和分析表征；最后，对第二步中收集整理的GAG信息进行整理，并利用统计学手段对数据进行分析，对可能的标志物进行筛选。本项目中建立了一套将凝胶电泳、色谱、质谱技术相结合的糖胺聚糖综合分析方法，所建立的分析方法可以提供对各类糖胺聚糖的精细和全面的结构解析。可以实现不同来源糖胺聚糖样品差异的精细分析，为寻找标志物提供了技术支持。且基于本项目所建立的用于糖胺聚糖完整糖链与组成单元分离的凝胶电泳分析法，简单易行，不需要昂贵的设备和复杂的实验条件，可以用于快速鉴别不同来源的糖胺聚糖。

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