AchR-DEC205偶联抗体靶向未成熟DC诱导免疫耐受治疗重症肌无力的研究
项目介绍
AI项目解读
基本信息
- 批准号:81102217
- 项目类别:青年科学基金项目
- 资助金额:20.0万
- 负责人:
- 依托单位:
- 学科分类:H1107.自身免疫性疾病
- 结题年份:2014
- 批准年份:2011
- 项目状态:已结题
- 起止时间:2012-01-01 至2014-12-31
- 项目参与者:孙辰婧; 张云飞; 徐江; 宋琛; 高洁; 林烨;
- 关键词:
项目摘要
重症肌无力(MG)是由自身抗体介导、T细胞依赖的器官特异性自身免疫性疾病,其发病的关键在于乙酰胆碱受体(AchR)自身耐受的打破;树突状细胞(DC)作为专职的抗原递呈细胞,在诱导和维持机体免疫耐受中发挥着重要作用。通过DC恢复或重建AchR自身耐受,可最终为MG的治疗提供有效方法。前期本课题组已经成功表达了人AchR α1亚单位胞外段(Hα1-210)蛋白,在此基础上,本研究拟通过化学的方法将Hα1-210与DC表面特异性受体-DEC205单克隆抗体偶联,合成Hα1-210-DEC205偶联抗体,体内将自身抗原特异性靶向未成熟DC,诱导AchR特异性免疫耐受的形成。本研究首次提出通过DEC-205受体体内靶向未成熟DC诱导AchR免疫耐受的新策略,有望获得对MG有良好治疗效果的新分子-Hα1-210-DEC205偶联抗体,建立特异性治疗自身免疫性疾病的新技术平台。
结项摘要
重症肌无力(MG)是典型的由自身抗体介导、T细胞依赖、补体参与的器官特异性自身免疫性疾病,乙酰胆碱受体(AChR)自身耐受的打破是其发病的关键所在;树突状细胞(DC)作为专职的抗原递呈细胞,依据其表型及功能的不同,在免疫应答中发挥着不同作用;未成熟DC(iDC)可通过多种方式诱导抗原特异性T细胞耐受,因此,以iDC为靶点诱导免疫耐受已成为治疗自身免疫性疾病的一个新的策略。本课题将MG自身抗原AchRα1亚基 97-116肽段与DC表面特异性受体CD-205单链抗体(scFv)进行融合表达,即融合单链抗体AChRα1-scFv205,通过SDS-PAGE以及Western blot对融合单链抗体的表达进行鉴定;同时我们从B6鼠骨髓中诱导培养iDC,与成熟DC(mDC)相比,其表面低表达MHC-II分子、CD80、CD86及CD40。体外细胞系试验证实AChRα1-scFv205与iDC具有较高的亲和力;混合淋巴细胞反应(MLR)结果显示:融合单链抗体早期可促进AChR特异性T细胞增殖;为进一步观察融合单链抗体体内靶向iDC,我们对其进行生物素标记,通过静脉注射的方法作用于EAMG小鼠,24小时后制备脾冰冻切片,免疫荧光染色发现AChRα1-scFv205与CD11c+DC共定位于脾脏,提示其体内可特异性靶向DC;我们分别在融合蛋白作用后第7、21天,MACS分选脾CD11c+DC以及CD4+T细胞,行混合淋巴细胞反应;与体外结果一致:AChRα1-scFv205早期可促进AChR特异性T细胞增殖,后期T细胞增殖明显下降;同时,我们发现AChRα1-scFv205可诱导CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞产生,且升高耐受型细胞因子IL-10、TGF-β的水平。我们对AChRα1-scFv205作用后脾CD11c+DC行表面分子染色,FCM结果显示:融合蛋白作用组DC表面MHC-II分子、CD80、CD86及CD40的表达较其他组降低,提示其在体内仍可维持其未成熟表型。本研究结果提示:融合单链抗体AChRα1-scFv205可抑制抗原特异性T细胞增殖,并通过诱导Treg细胞而发挥免疫耐受作用;本研究首次提出通过CD-205scFv体内抗原靶向iDC诱导AChR免疫耐受的新策略,有望对MG以及其他自身免疫性疾病提供新的治疗策略!
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Intrathymic Tfh/B Cells Interaction Leads to Ectopic GCs Formation and Anti-AChR Antibody Production: Central Role in Triggering MG Occurrence
胸腺内 Tfh/B 细胞相互作用导致异位 GC 形成和抗 AChR 抗体产生:在触发 MG 发生中的核心作用
- DOI:10.1007/s12035-014-8985-1
- 发表时间:2016-01-01
- 期刊:MOLECULAR NEUROBIOLOGY
- 影响因子:5.1
- 作者:Zhang, Xiaoyan;Liu, Shasha;Yang, Kun
- 通讯作者:Yang, Kun
小鼠AChR(m97-116)肽段-CD205融合单链抗体的表达及活性检测
- DOI:--
- 发表时间:2015
- 期刊:中国神经免疫学和神经病学杂志
- 影响因子:--
- 作者:孙超;袁媛;郑鹏飞;高星;赵元琳;李乐;常婷;李柱一
- 通讯作者:李柱一
共 2 条
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其他文献
Tfh细胞在重症肌无力患者胸腺中的表达及作用机制
- DOI:--
- 发表时间:2015
- 期刊:中国神经免疫学和神经病学杂志
- 影响因子:--
- 作者:常婷;刘沙沙;杨琨;李柱一
- 通讯作者:李柱一
各国规范铝合金轴压构件局部稳定设计方法对比
- DOI:--
- 发表时间:2013
- 期刊:沈阳建筑大学学报(自然科学版)
- 影响因子:--
- 作者:王元清;常婷;石永久;郭小良
- 通讯作者:郭小良
不同氨氮浓度对4株常见藻株生长及酶活性的影响
- DOI:10.13227/j.hjkx.201811224
- 发表时间:2019
- 期刊:环境科学
- 影响因子:--
- 作者:常婷;许智慧;程鹏飞;徐继林;周成旭
- 通讯作者:周成旭
人AChR-Fc融合蛋白真核表达载体的构建和表达
- DOI:--
- 发表时间:--
- 期刊:中国神经免疫学和神经病学杂志
- 影响因子:--
- 作者:常婷;林宏;刘煜;李柱一;CHANG Ting;LIN Hong;LIU Yu;LI Zhu-yi
- 通讯作者:LI Zhu-yi
奥氏体不锈钢滞回本构模型研究
- DOI:--
- 发表时间:2015
- 期刊:工程力学
- 影响因子:--
- 作者:王萌;杨维国;王元清;常婷;石永久
- 通讯作者:石永久
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常婷的其他基金
2型固有淋巴细胞对重症肌无力的作用及机制研究
- 批准号:
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2型固有淋巴细胞对重症肌无力的作用及机制研究
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- 批准年份:2022
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