耐辐射奇球菌特殊Fur蛋白的功能研究

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基本信息

  • 批准号：
    31100058
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    23.0万
  • 负责人：
    陈欢
  • 依托单位：
    温州医科大学
  • 学科分类：
    C0104.微生物遗传与生物合成
  • 结题年份：
    2014
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2014-12-31

项目摘要

耐辐射奇球菌（Deinococcus radiodurans，DR）高效的抗氧化能力是其极端抗性的重要原因，它的Mn/Fe代谢系统对辐射损伤的蛋白有重要的保护作用。但关于Mn/Fe代谢及抗氧化相关蛋白如何在DR菌协同作用还未被解释清楚。前期研究中，我们鉴定了OxyR和DtxR蛋白，而属于Fur蛋白家族的DR0865的功能却仍未鉴定。Fur蛋白家族可以调控Mn/Fe和氧化压力应激蛋白。序列比对发现DR0865是DR菌中唯一一个属于Fur家族的蛋白，它具有和H.pylori的Fur相似的三个可能金属离子结合功能域，但在具体的位点上又有差异。因此，通过对DR0865蛋白功能和转录调控研究，不仅有利于丰富Fur蛋白家族的工作机制，更有利于剖析DR菌的抗氧化机制（包括Mn/Fe调控），为构建DR菌的氧化压力调控网络奠定基础。

结项摘要

金属离子的代谢平衡在原核生物和真核生物中都十分的重要。耐辐射奇球菌是一种极端微生物，它对电离辐射、紫外等一系列的极端环境有很强的耐受力。很多研究发现该菌胞内相对较高的锰/铁比率对其的抗性机制有重要的意义。在此研究中，我们对锰/铁调控的机制进行了研究，获得了以下结果：.1、鉴定了DR0865为Fur家族的蛋白。我们发现dr0865的突变株对锰压力条件下十分敏感，此外，该突变株还对电离辐射、紫外的压力也表现出了敏感性；.2、通过ICP-MS实验，我们还发现在突变株中积累了相对多的Mn、Cu、Fe等金属离子，说明DR0865不仅仅只在锰离子代谢平衡中起到作用；.3、通过对突变株和野生株在锰压力条件下的转录组研究，我们进一步发现DR0865对mntE（锰离子外排蛋白）起正调控作用，而对dr2283, dr2284和dr2523（ABC依赖的猛吸收蛋白）起负调控作用。进一步证明了DR0865对锰的调控作用；.4、我们还纯化了DR0865蛋白，DNA结合实验证明了它可以与dr2523结合，并且结合能力随着金属离子浓度的增加而增强。

项目成果

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其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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