介导受体基因表达的miRNA在PRRSV感染增殖中的作用及机制

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31501924
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    21.0万
  • 负责人：
    吴俊静
  • 依托单位：
    湖北省农业科学院
  • 学科分类：
    C1702.家畜种质资源与遗传育种学
  • 结题年份：
    2018
  • 批准年份：
    2015
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2016-01-01 至2018-12-31

项目摘要

Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome (PRRS) is one of the most harmful and difficult to control diseases in commercial pigs, leading to significant economic losses in swine industry worldwide, and novel control strategies are sought. miRNAs play an important role in virus-host interaction by regulating the key genes expression in virus infection or host innate immunity. In our previous study, we found that miR-506 and miR-4262 targeted to the key PRRSV receptor genes. As we inferred that these two miRNAs can further affect the PRRSV replication by regulation the PRRSV receptor genes. Therefore, in this project we will focus on these two identified miRNAs to research their functions and regulation mechanisms during PRRSV infection at the molecular, cellular and individual levels respectively, and further clarify the antiviral function and mechanisms of miRNAs mediated PRRSV receptor genes expression during infection. The results of this project will provide theoretical foundation for the development of new drugs for prevention and control of PRRSV, and new strategy for genetic breeding of anti-PRRS breeds in future.
猪繁殖呼吸综合征（PRRS）是当前危害最大、控制最难的猪传染病之一，对全球养猪业造成了巨大经济损失，至今尚无有效控制手段。近年来研究表明miRNA在病毒感染和宿主天然免疫中发挥重要作用。申请人在前期研究中发现miR-506和miR-4262能靶向调控PRRSV关键受体基因，据此推测这两个目标miRNA可介导受体基因调控PRRSV感染增殖。故本研究拟采用腺病毒载体在猪肺泡巨噬细胞（PAM）和仔猪中上调和下调表达目标miRNA，在细胞和个体水平分别检测目标miRNA的抗病毒效应及受体基因表达量变化。同时，分析PRRSV感染PAM后目标miRNA表达变化规律，并从启动子活性、转录因子调控方面分析其表达调控机理。进而深入解析miRNA介导PRRSV受体基因调控PRRSV感染增殖的作用机制。研究结果将为PRRS的综合防制提供新型防控药物设计靶点和新的防控策略，也为PRRS的抗病育种奠定基础。

结项摘要

猪繁殖呼吸综合征（PRRS）对养猪业危害巨大，由于其具有免疫抑制性等特征，仅依靠疫苗无法完全有效控制。虽然目前国外已有报道CD163基因编辑猪已成功构建，其对PRRSV不易感，但是其产业化道路仍然还不明确。本研究通过筛选鉴定靶向调控PRRSV关键细胞受体基因表达的miRNAs，获得了2个显著抑制PRRSV感染增殖的miRNAs：（1）miR-506可同时靶向作用PRRSV受体基因CD151与VIM抑制PRRSV感染增殖；（2）miR-4262可靶向作用PRRSV受体基因CD163抑制PRRSV感染增殖。同时，利用sRNA-seq技术对比分析了猪肺泡巨噬细胞在PRRSV感染、PolyI:C刺激后差异表达miRNAs，初步筛选鉴定了33个参与猪天然免疫且与PRRSV感染相关的miRNAs，并发现ssc-miR-27b-3p可显著抑制PRRSV在Marc-145和PAM细胞中的增殖，同时超表达ssc-miR-27b-3p的仔猪在PRRSV感染后存活时间稍长于对照组。研究还发现PRRSV感染细胞早期（12h）抑制ssc-miR-27b-3p表达，且转录因子NF-κB上调表达可显著激活ssc-miR-27b-3p的表达。综上，以上新鉴定获得的3个具有抗PRRSV增殖的miRNAs，可以作为新型药物设计靶点进行药物研发，也可以用于构建抗病分子育种新技术，为培育PRRS的抗病新品种（系）奠定基础。

项目成果

期刊论文数量（4）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（3）
调控CD163基因表达的miRNA鉴定及其在PRRSV感染中的作用分析
  • DOI：
    10.15889/j.issn.1002-1302.2017.13.004
  • 发表时间：
    2017
  • 期刊：
    江苏农业科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    吴俊静;乔木;武华玉;彭先文;梅书棋
  • 通讯作者：
    梅书棋
Genome-wide analysis of long noncoding RNA and mRNA profiles in PRRSV-infected porcine alveolar macrophages
PRRSV 感染的猪肺泡巨噬细胞中长非编码 RNA 和 mRNA 谱的全基因组分析
  • DOI：
    10.1016/j.ygeno.2019.10.024
  • 发表时间：
    2020-03-01
  • 期刊：
    GENOMICS
  • 影响因子：
    4.4
  • 作者：
    Wu, Junjing;Peng, Xianwen;Mei, Shuqi
  • 通讯作者：
    Mei, Shuqi
ssc-miR-27b-3p在猪繁殖于呼吸综合征病毒感染中的作用分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2018
  • 期刊：
    湖北农业科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    吴俊静;季子云;乔木;武华玉;刘贵生;彭先文;梅书棋
  • 通讯作者：
    梅书棋

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其他文献

猪USF1基因克隆与序列分析
  • DOI：
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  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    湖北农业科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    彭先文;李良华;吴俊静;梅书棋
  • 通讯作者：
    梅书棋

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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