SOCS1调控DC细胞凋亡网络通路在非小细胞肺癌中作用的初步研究

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81060185
项目类别：
地区科学基金项目
资助金额：
25.0万
负责人：
宋鑫
依托单位：
昆明医科大学
学科分类：
H1819.肿瘤生物治疗
结题年份：
2013
批准年份：
2010
项目状态：
已结题
起止时间：
2011-01-01 至2013-12-31

项目参与者：
刘静毅；陈晓丹；张志伟；董苏伟；王莹；赖章超；杨蕾；尚志梅；陈思毅；
关键词：
非小细胞肺癌信号通路 SOCS1 凋亡 DC

项目摘要

云南省肺癌发病率居全国首位。诸多研究表明，肺癌中DC细胞大多处于未成熟状态，抗原提呈能力极弱，由此引起的免疫耐受成为临床肿瘤生物治疗难以突破的瓶颈。我们的研究发现：SOCS1为DC细胞内主要的抗原提呈衰弱子之一，沉默 SOCS1，DC细胞表面主要组织相容性分子、共刺激分子与趋化因子高表达（图一），抗原提呈能力显著增强，同时抑制Treg细胞扩增（图二），对B16荷瘤小鼠肿瘤生长具有很强的抑制作用（图三），显著优于常规DC细胞治疗方法。进一步研究表明,沉默SOCS1导致机体免疫耐受的逆转与凋亡网络通路密切相关，那么，沉默SOCS1后凋亡通路如何促进DC细胞成熟？成熟的DC细胞如何逃避凋亡，以持续呈递抗原？基于上述问题，我们拟筛选与DC细胞凋亡相关蛋白，探讨SOCS1干预DC细胞凋亡相关的网络通路，为进一步提高以DC细胞为基础的生物治疗疗效提供理论依据。

结项摘要

云南省肺癌发病率居全国首位。肿瘤生物治疗为目前肿瘤治疗的第四大手段，以树突状细胞（Dendritic Cell, DC）为基础的生物治疗，能够有效激活机体的抗肿瘤免疫，已成为临床研究的热点。肺癌中DC细胞大多处于未成熟状态，抗原提呈能力极弱，由此引起的免疫耐受成为临床肿瘤生物治疗难以突破的瓶颈。细胞信号转导蛋白1（Suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1）为DC细胞内主要的抗原提呈衰弱子之一。研究表明,沉默SOCS1导致机体免疫耐受的逆转与凋亡网络通路密切相关。由此，我们以非小细胞肺癌（NSCLC）患者体外培养的DC细胞为研究模型，利用慢病毒载体成功沉默DC细胞内源性SOCS1的表达。在此基础上，阻断/不阻断DC细胞的SOCS1,利用Agilent Human 8x60K 芯片，筛选出包括JUK、STAT等在内的一系列差异表达基因，且通过RT-PCR及WB等在mRNA及蛋白水平进行初步验证，初步沉默证实SOCS1导致机体免疫耐受的逆转可能的网络通路。进一步研究结果显示：沉默SOCS1后，流式细胞术检测DC细胞表面主要组织性分子（HLA-DR）、趋化因子(CCR7)及DC表面分化抗原（CD80、CD86、CD83、CD40等）表达均增高，提示沉默SOCS1后能增强DC细胞的抗原提呈能力；同时，沉默DC细胞的SOC1后与T细胞共培养，利用MTS检测发现SOCS1沉默组T细胞增殖能力显著增强，ELASE等检测其分泌的IL-6、IL-12、TNF-α及INF-γ等细胞因子增多，LDH实验显示其杀伤能力增强，提示沉默DC细胞的SOC1后其能增强T细胞的杀瘤效应；且SOCS1沉默后能抑制Treg细胞的扩增。同时荷瘤小鼠实验显示，沉默DC细胞的SOCS1后，其肿瘤生长明显明显减慢，显示出较强的抑瘤效应。以上实验为进一步提高以DC细胞为基础的生物治疗疗效提供理论依据。