葛根芩连方/Genistein通过Ca2+介导的IP3-DAG-PKC和CaMKII通路调控RV感染性腹泻中NHEs的机制

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81473401
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    68.0万
  • 负责人：
    赵文昌
  • 依托单位：
    广东医科大学
  • 学科分类：
    H3213.中药抗病毒与感染药理
  • 结题年份：
    2019
  • 批准年份：
    2014
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2015-01-01 至2019-12-31

项目摘要

The mammalian Sodium hydrogen transfer proteins (NHEs) exert the importance on regulating water and sodium metabolism,but the function and mechanism of intestinal NHEs in diarrhea during rotavirus (RV) infection still remain unclear. Our previous work indicated that Gegen Qinlian Formula (GGQL) had potential activity to against rotavirus, which could also down-regulation the mRNA expression of NHE-1, NHE-6 in Caco-2 cells. Herein, we will prepare the recombinant fusion protein GST-NSP4T, then suckling mice or Caco-2 cells will be inoculated with the rotavirus or GST-NSP4T. In this project, we will investigate the expressions of some intestinal NHEs induced by RV and GST-NSP4T in suckling mice or Caco-2 cells. The stable transfection with short hairpin RNA (shRNA) mediated NHEs of Caco-2 cell monolayer will be use for determining the the functions of relevant NHEs, including water and sodium metabolis using HPLC and positron nuclide 22Na technique, and demonstrate GGQL/Genistein will through Ca+ - phospholipid - dependent protein kinase and CaMKII signaling pathways to regulate the NHEs activity. Our research will support NHEs as a new target in RV-induced diarrhea, and will provide adequate scientific basis for GGQL/Genistein used in anti-RV infectious diarrhea.
钠氢转运子（NHEs）在调节水钠吸收等多方面具有重要作用。前期研究发现葛根芩连方具有抗RV腹泻的作用，所含染料木素体外可干扰RV生物合成，该方可下调RV感染Caco-2细胞NHE1,6mRNA表达。目前NHEs在RV感染性腹泻中的作用与机制尚不清楚。基于此，拟建立RV及RV非结构白蛋白4感染乳鼠和Caco-2细胞模型，系统研究9种NHEs在肠道的分布及表达变化；制备稳定转染shNHEs的Transwell模型，并结合高效液相色谱、正电子核素22Na测定等技术，建立同时定量检测水钠吸收的方法，评价相关NHEs的功能；揭示通过Ca2+介导的IP3/DAG-PKC和CaMKII途径调控NHEs活性的机制；同时进行葛根芩连方及染料木素干预对比研究，阐明该方通过此途径抗RV感染性腹泻的机制及物质基础。该研究将为NHEs作为RV致泻新靶点提供可靠证据，为该方应用于抗RV感染性腹泻提供充分科学依据。

结项摘要

轮状病毒(Rotavirus，RV)是导致婴幼儿腹泻的主要病原体，全球每年约有1.1亿人发生感染，死亡人数约20万。目前临床缺乏特效药物，RV疫苗价格昂贵，预防范围有限，如何防治RV感染是重大的难题。.本课题主要采用RV感染细胞模型和动物模型研究了RV对NHEs的表达和调控机制的影响。乳鼠实验结果表明，1.SA-11株RV能够感染四天龄的昆明乳鼠并导致其腹泻，病程至少可以维持四天，腹泻率、腹泻程度与病毒剂量有关。2. 葛根芩连芳（GGQL）对感染RV的乳鼠腹泻有一定的预防和治疗作用，可以减低乳鼠腹泻率和腹泻程度。3. GGQL可以有效地清除乳鼠体内的轮状病毒抗原，也可以减少RV导致的乳鼠肠道细胞凋亡和空泡化现象。4. 模型组可以降低NHE1、NHE2、NHE3和NHE8的mRNA和蛋白在肠道的表达水平，各给药组可以不同程度上调它们的mRNA和蛋白在肠道的表达水平，提示我们NHE1、NHE2、NHE3和NHE8可能与RV感染的作用有关。.细胞实验结果表明，1.来源于人的RV-Wa株病毒可以下调人结肠癌Caco-2细胞中NHE1，NHE6，NHE7和NHE8的mRNA表达，但是来源于猴的SA-11株RV对这四个NHEs的mRNA表达却没有表现出下调的作用。说明不同种属来源的RV对NHEs的影响不一样。 2.RV-Wa的感染使到Caco-2细胞中NHE1和NHE6的表达下调，但对NHE8的蛋白表达并没明显差异。因此我们推测NHE1和NHE6可以作为RV感染的作用靶点之一。3. 染料木素可以上调RV-Wa感染Caco-2后的NHE1和NHE6的mRNA水平；但是对NHE1和NHE6的蛋白表达并无明显的上调作用，说明染料木素对NHE1和NHE6的调控可能是发生在转录水平上。4. RV-Wa感染后可以下调CaM和CaMKII的蛋白水平表达，因此我们推测RV可能是通过Ca2+/CaM/CaMKII通路对NHE1和NHE6进行调控作用。.该课题主要针对NHEs 与RV诱导的感染性腹泻水钠吸收失调的相关性为基点进行了研究，从新的角度揭示了RV腹泻发生水钠吸收异常的机制并寻找到新的诊断和药物作用靶点，其中肠道NHE1和NHE6的功能以及RV对其调控作用是下一步研究重点，也可为临床治疗RV提供潜在的治疗靶标。

项目成果

期刊论文数量（6）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（2）
白术内酯 I、II、III 体内外抗轮状病毒作用研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2019
  • 期刊：
    中草药
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    周若夏;宋丽军;施晓莹;王晓桐;谈文盼;卢欢倩;赵文昌
  • 通讯作者：
    赵文昌
Genistein inhibits rotavirus replication and upregulates AQP4 expression in rotavirus-infected Caco-2 cells
金雀异黄素抑制轮状病毒复制并上调轮状病毒感染的 Caco-2 细胞中 AQP4 的表达
  • DOI：
    10.1007/s00705-015-2404-4
  • 发表时间：
    2015-06-01
  • 期刊：
    ARCHIVES OF VIROLOGY
  • 影响因子：
    2.7
  • 作者：
    Huang, Haohai;Liao, Dan;Zhao, Wenchang
  • 通讯作者：
    Zhao, Wenchang
Clinical efficacy of oral immunoglobulin Y in infant rotavirus enteritis
口服免疫球蛋白Y治疗婴儿轮状病毒肠炎的临床疗效
  • DOI：
    10.1097/md.0000000000016100
  • 发表时间：
    2019-07
  • 期刊：
    Systematic Review and Meta-Analysis
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Xiaotong Wang;Lijun Song;Wenpan Tan;Wenchang Zhao
  • 通讯作者：
    Wenchang Zhao
Human rotavirus strain Wa downregulates NHE1 and NHE6 expressions in rotavirus-infected Caco-2 cells
人轮状病毒株Wa下调轮状病毒感染的Caco-2细胞中NHE1和NHE6的表达
  • DOI：
    10.1007/s11262-017-1444-0
  • 发表时间：
    2017-06-01
  • 期刊：
    VIRUS GENES
  • 影响因子：
    1.6
  • 作者：
    Chen, Honglang;Song, Lijun;Zhao, Wenchang
  • 通讯作者：
    Zhao, Wenchang
NHEs 在腹泻中的研究进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2017
  • 期刊：
    Guangdong Medical Journal
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    陈洪浪;宋丽军;赵淑敏;陈文锋;赵文昌
  • 通讯作者：
    赵文昌

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI：
    {{ item.doi || "--"}}
  • 发表时间：
    {{ item.publish_year || "--" }}
  • 期刊：
    {{ item.journal_name }}
  • 影响因子：
    {{ item.factor || "--"}}
  • 作者：
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者：
    {{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

其他文献

SYBR GreenⅠRT-PCR定量检测葛根芩连方对Wa株轮状病毒感染乳鼠小肠上皮SLC5A1 mRNA表达的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    中华中医药杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    赵文昌;谭晓梅;杨蒙蒙;罗佳波
  • 通讯作者：
    罗佳波
Wa株轮状病毒感染昆明小鼠乳鼠腹泻模型的建立及影响因素考察
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    赵文昌;谭晓梅;杨蒙蒙;罗佳波
  • 通讯作者：
    罗佳波
葛根芩连方抗Wa株轮状病毒的药效学研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    中国中医药信息杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    赵文昌;谭晓梅;杨蒙蒙;罗佳波
  • 通讯作者：
    罗佳波

其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI：
    {{ item.doi || "--" }}
  • 发表时间：
    {{ item.publish_year || "--"}}
  • 期刊：
    {{ item.journal_name }}
  • 影响因子：
    {{ item.factor || "--" }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者：
    {{ item.author }}
empty
内容获取失败，请点击重试
重试联系客服
title开始分析
查看分析示例
此项目为已结题，我已根据课题信息分析并撰写以下内容，帮您拓宽课题思路：

AI项目思路

AI技术路线图

赵文昌的其他基金

RV感染斑马鱼模型的建立、病理新机制和中药的筛选研究
  • 批准号：
    81973548
  • 批准年份：
    2019
  • 资助金额：
    55 万元
  • 项目类别：
    面上项目

相似国自然基金

{{ item.name }}
  • 批准号：
    {{ item.ratify_no }}
  • 批准年份：
    {{ item.approval_year }}
  • 资助金额：
    {{ item.support_num }}
  • 项目类别：
    {{ item.project_type }}

相似海外基金

{{ item.name }}
{{ item.translate_name }}
  • 批准号：
    {{ item.ratify_no }}
  • 财政年份：
    {{ item.approval_year }}
  • 资助金额：
    {{ item.support_num }}
  • 项目类别：
    {{ item.project_type }}
{{ showInfoDetail.title }}

作者：{{ showInfoDetail.author }}

知道了

AI项目解读示例

课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
关闭
close
客服二维码