C-端结构域在PARN型脱腺苷酸酶分子调控中的作用研究
项目介绍
AI项目解读
基本信息
- 批准号:30900251
- 项目类别:青年科学基金项目
- 资助金额:20.0万
- 负责人:
- 依托单位:
- 学科分类:C0505.蛋白质、多肽与酶生物化学
- 结题年份:2012
- 批准年份:2009
- 项目状态:已结题
- 起止时间:2010-01-01 至2012-12-31
- 项目参与者:丁晓岚; 何光军; 葛云霄; 李厂; 王寅;
- 关键词:
项目摘要
在mRNA水平上研究基因表达调控是揭示细胞生理代谢过程的核心问题之一。PARN是高等生物中降解mRNA poly(A)尾巴的最主要的酶,参与了众多的重要生理过程,如卵母细胞的成熟、早期胚胎发育、细胞周期的调控、对激素的应答以及对营养状态的应答等。PARN是一个多亚基多结构域蛋白,在体内受到多种生理因素的多层次调控,但对其调控机制了解很少。我们的前期研究表明其C-端结构域(CTD)可能在PARN分子调控中起重要作用,但序列分析表明CTD的规则二级结构含量很少。本项目将通过构建缺失和点突变体,采用酶促反应动力学、光谱学、免疫共沉淀、细胞定位等实验,回答以下几个关键科学问题:(1)CTD的结构特征;(2)磷酸化和蛋白质相互作用诱导CTD的结构变化;(3)CTD结构变化与PARN生理功能调控之间的关系。本项目的研究成果将为深入了解PARN的生理功能提供线索。
结项摘要
在mRNA水平上研究基因表达调控是揭示细胞生理代谢过程的核心问题之一。PARN是高等生物中降解mRNA poly(A)尾巴的最主要的酶,参与了众多的重要生理过程,如卵母细胞的成熟、早期胚胎发育、细胞周期的调控、对激素的应答以及对营养状态的应答等。PARN是一个多亚基多结构域蛋白,在体内受到多种生理因素的多层次调控,但对其调控机制了解很少。我们的前期研究表明其C-端结构域(CTD)可能在PARN分子调控中起重要作用,但序列分析表明CTD的规则二级结构含量很少。本项目通过构建缺失和点突变体,采用酶促反应动力学、光谱学、免疫共沉淀、细胞定位等实验,取得了一下研究成果:(1)通过光谱学鉴定,发现CTD的结构特征属于天然没有有序结构的区域(intrinsically disordered region);(2)研究发现pH、温度、离子强度和磷酸化等条件对CTD的二级结构没有显著影响,TFE可以诱导有序二级结构的形成。离子强度对CTD的三级结构有影响,暗示CTD上具有钾离子的结合位点;(3)通过细胞定位实验,发现CTD上的核定位序列介导了PARN的入核。通过免疫共沉淀实验,发现CTD介导了PARN的蛋白质相互作用。总之,本项目的研究结果表明,CTD可能通过与其它蛋白相互作用时的结构变化来介导PARN的蛋白质相互作用,从而调控PARN的功能。本项目的研究成果为进一步探索PARN的生理功能提供线索。
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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