新疆鱼类水霉病病原菌多样性研究

Saprolegniasis is one of the major disease in fishery production, which is difficult to solve it. The research about Saprolegniasis is limited and not systemic. the disordered status about their taxonomic rank confused the people. Our project would isolate the pathogenies from different water bodies and different fish species. Observed the growth, reproductive and morphological status of pathogens, we confirm their classification; and we plant to analyze the composition of cell wall, and explore the changes polysaccharide in cell wall; According to the candidate’s ITS sequence in 18S rRNA and DNA composition, we will analyze their genetic relationship. At last, we discuss the environmental adaptability of Saprolegniasis, and the host diversity of pathogenies through their host range. In this study, we build the library of Saprolegniasis Pathogens in Xinjiang, analyze pathogen species diversity, environmental adaptation diversity and host diversity research. The works will help us to understand how to prevent Saprolegniasis and explore the drug to solve it.

水霉病是危害渔业生产的主要疾病之一，目前，没有有效的防治方法。当前对水霉菌的研究比较混乱，系统性差，水霉菌的分类地位也存在较大争议。本项目拟从不同水体、不同鱼体分离获得致病水霉菌。对已确定的致病菌进行生长、生殖等形态学观察，初步确定各致病菌分类地位；对致病菌细胞壁纤维素、葡聚糖等多糖含量测定，探讨壁物质化学组成变化多样性；根据致病菌18SｒRNA ITS序列保守性及DNA组成，分析水霉病原菌的亲缘关系。同时探讨致病水霉菌环境适应多样性，并根据致病菌对寄主鱼类的选择性和致病力大小，探讨致病水霉菌的寄主多样性。本研究通过对水霉致病菌的种属多样性、环境适应多样性、寄主多样性的研究，初步建立新疆鱼类水霉病致病菌库，为水霉病防治途径和防治药物的开发奠定基础。

鱼类水霉病是防治难度较大的病害之一，每年给养殖业带来巨大的经济损失。由于其病原为真菌，且研究者较少，对病原认识非常有限，一直没有开发出有效的防治药物。本项目选择具有代表性的新疆伊犁、阿勒泰、库尔勒、昌吉地区的水域，分离获得水霉病原菌，对其进行多样性的系统研究，建立新疆鱼类水霉病原菌菌种库，为鱼类水霉病的防治提供理论依据。.经过四年研究，共分离获得水霉病病原菌39株，依据科赫法则全部认定为病原菌。形态学分类结果分属于水霉属、茎点属、根霉属、网囊霉属、疫霉属、绵霉属、隐囊霉属、破囊霉属、水霉科、丝囊霉属等10属；18S rDNA分类鉴定结果分属于镰刀菌属、毛霉属、水霉属、小不整球壳属、腔菌目、内座壳属、腐霉属、横梗霉属、根毛霉属、青霉属等10属，形态学与18S rDNA分类鉴定结果分歧较大，二者分类结果只有5%的菌株一致，但都反映了新疆鱼类水霉病病原菌种多样性显著；与文献报道结果比对，39株菌株中有18株从未有人报道过为水霉病病原菌。细胞壁中多糖与蛋白质含量比以及18S rDNA 中GC含量聚类分析结果显示这二项指标具有辅助分类学意义。在设定的不同的温度、pH、盐度条件下，水霉病病原菌表现出环境适应的多样性。不同地区菌株对环境的适应性存在差异，但这种差异是与菌株的生长环境相一致，特别是盐度适应性差异更大。多数研究认为，大多数菌株引起水霉病发生属于机会性致病，菌株攻毒实验结果显示，同一菌株可以感染不同鱼卵，但感染率存在差异，说明水霉病原菌在同等机会下对寄主有一定的选择性；同一病灶处可以分离出多株不同的菌株，说明水霉病一般是病原菌复合感染结果。.项目的科学意义在于发现了更多的鱼类水霉病病原菌，对其难以防治的原因有了更深的认识；对于丝状真菌分类，形态学、分子生物学方法的可靠性都有待进一步提高；基本建立了新疆鱼类水霉病原菌库，为后续研究积累了原始资料。

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