Ad/rAAV杂合体病毒介导RNAi抗HBV实验研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30471541
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    20.0万
  • 负责人：
    李绍祥
  • 依托单位：
    中国人民解放军总医院
  • 学科分类：
    H2103.肝炎病毒与感染
  • 结题年份：
    2008
  • 批准年份：
    2004
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2005-01-01 至2008-12-31

项目摘要

（1）筛选RNAi抗HBV的有效序列；（1）将产生shRNA的表达盒克隆入AAV的ITR之间，形成无Rep和Cap基因的rAAV，再将其重组入腺病毒穿梭质粒中；（2）把Rep基因置于HBV基本核心启动子（BCP）驱动下，也重组入腺病毒穿梭质粒中，将来用于从腺病毒基因组中拯救rAAV并恢复其定点整合能力；（3）用细菌内高效同源重组法构建重组Ad／rAAV杂合体病毒；（4）Ad／rAAV感染肝细胞后，随着HBV 3.5 kb mRNA的转录，Rep基因在BCP控制下，也进行转录，表达的Rep蛋白将rAAV基因组拯救出来，大量复制，并介导其定点整合至靶细胞染色体中；（5）整合rAAV长期表达shRNA，使RNAi抗HBV具有持久性。Ad／rAAV既有腺病毒的感染性和易于生产的优点，又恢复了rAAV定点整合能力，克服了腺病毒表达外源基因时间短和rAAV制备难的缺陷，使RNAi具有了长效性。

结项摘要

项目成果

期刊论文数量（3）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
靶向HBV C区RNAi对HBV复制和HBeAg表达的抑制作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    山东医药, 2007，47（ 26）：4-6
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：
RNAi靶向抑制HBV复制和HBeAg表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    河北医科大学学报，2008，29（31）：333－336
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：
靶向HBV X基因的shRNA表达质粒对HBV复制的抑制作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    昆明医学院学报，2008，29（6）：1-4
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：

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其他文献

其他文献

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AI项目思路

AI技术路线图

李绍祥的其他基金

HCV NS5B蛋白的RdRP活性对RNAi扩增的影响
  • 批准号：
    30872353
  • 批准年份：
    2008
  • 资助金额：
    8.0 万元
  • 项目类别：
    面上项目

相似国自然基金

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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