酶耦联催化儿茶素定向转化茶黄素的反应机理研究
项目介绍
AI项目解读
基本信息
- 批准号:30901002
- 项目类别:青年科学基金项目
- 资助金额:20.0万
- 负责人:
- 依托单位:
- 学科分类:C2001.食品原料学
- 结题年份:2012
- 批准年份:2009
- 项目状态:已结题
- 起止时间:2010-01-01 至2012-12-31
- 项目参与者:屠幼英; 李伟; 李博; 徐懿; 梅鑫; 蔡晓红; 王奕;
- 关键词:
项目摘要
茶黄素和茶红素是红茶的重要品质成分,研究证实,红茶中茶黄素主要由多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)催化儿茶素氧化形成,两种酶作用方式略不同。同时,由于茶叶中简单儿茶素含量不高,且对茶黄素的形成至关重要。本项目拟利用单宁酶可切断儿茶酚与没食子酸间酯键的特性,通过单宁酶水解茶多酚的研究,获得儿茶素组成比例均衡的复合物。以上述复合物为底物,针对酶促耦联氧化反应中,儿茶素底物竞争性以及PPO、POD酶对八种儿茶素催化专一能力不明确等问题,研究PPO、POD对不同儿茶素底物的竞争性,获得底物竞争性反应次序,建立儿茶素定向转化茶黄素的优化体系,系统地阐明儿茶素定向转化反应机理及控制方法。对反应产物进行制备、分离,完成结构的分析和鉴定,并比较其抗氧化功效,筛选抗氧化活性产物;通过急性、慢性毒性实验,评价高抗氧化活性反应产物的安全性。最终实现安全的、高活性的茶黄素产物的体外定向生物转化。
结项摘要
本研究运用单宁酶的水解催化特性,系统研究了反应参数(酶、温度、底物、反应时间)对酯型儿茶素含量变化及简单儿茶素生成量的影响。通过设计正交试验,筛选优化的单宁酶-茶多酚水解体系,获得了可用于调控成分比例的水解动力学方程,实现茶多酚底物组成的定向调控。应用上述反应产物,研究多酚氧化酶、过氧化物酶及儿茶素底物体外合成茶黄素的反应机制。研究结果明确了多酚氧化酶对茶多酚底物亲和性优于过氧化物酶;过氧化物酶对茶黄素底物的亲和性优于茶多酚底物,因此要定向生物合成茶黄素应避免过氧化物酶的消极作用。四种儿茶素底物中EGCG与酶的亲和性最高,与茶黄素单体TF3的高形成量相关;通过调控简单儿茶素EC和EGC的比例,获得相应的TF1产物,可望实现TF1的体外高效生物合成。利用大孔树脂和半制备色谱技术可以高效、快速地分离制备高纯度茶黄素单体,该方法可进一步放大并用于大规模生产。此外,通过四种茶黄素单体体外清除活性氧自由基的能力及抗DNA氧化损伤的功能研究,阐明了茶黄素单体的构效关系。本项目研究结果为茶黄素在医药、保健品等领域的广泛应用提供了理论和实验依据。
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
ISOLATION AND PURIFICATION OF FOUR INDIVIDUAL THEAFLAVINS USING SEMI-PREPARATIVE HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY
使用半制备高效液相色谱分离和纯化四种茶黄素
- DOI:10.1080/10826076.2010.526865
- 发表时间:2010-11
- 期刊:JOURNAL OF LIQUID CHROMATOGRAPHY & RELATED TECHNOLOGIES
- 影响因子:--
- 作者:Xu, Yi;Jin, Yuxia;Wu, Yuanyuan;Tu, Youying
- 通讯作者:Tu, Youying
Evaluation of the antioxidant effects of four main theaflavin derivatives through chemiluminescence and DNA damage analyses
通过化学发光和DNA损伤分析评估四种主要茶黄素衍生物的抗氧化作用
- DOI:10.1631/jzus.b1100041
- 发表时间:2011-09-01
- 期刊:JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY-SCIENCE B
- 影响因子:5.1
- 作者:Wu, Yuan-yuan;Li, Wei;Tu, You-ying
- 通讯作者:Tu, You-ying
茶黄素抑菌作用的研究
- DOI:--
- 发表时间:--
- 期刊:中国食品学报
- 影响因子:--
- 作者:金恩惠;吴媛媛;屠幼英
- 通讯作者:屠幼英
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- 通讯作者:孙秀珍
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