酶耦联催化儿茶素定向转化茶黄素的反应机理研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    30901002
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    20.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    C2001.食品原料学
  • 结题年份:
    2012
  • 批准年份:
    2009
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

茶黄素和茶红素是红茶的重要品质成分,研究证实,红茶中茶黄素主要由多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)催化儿茶素氧化形成,两种酶作用方式略不同。同时,由于茶叶中简单儿茶素含量不高,且对茶黄素的形成至关重要。本项目拟利用单宁酶可切断儿茶酚与没食子酸间酯键的特性,通过单宁酶水解茶多酚的研究,获得儿茶素组成比例均衡的复合物。以上述复合物为底物,针对酶促耦联氧化反应中,儿茶素底物竞争性以及PPO、POD酶对八种儿茶素催化专一能力不明确等问题,研究PPO、POD对不同儿茶素底物的竞争性,获得底物竞争性反应次序,建立儿茶素定向转化茶黄素的优化体系,系统地阐明儿茶素定向转化反应机理及控制方法。对反应产物进行制备、分离,完成结构的分析和鉴定,并比较其抗氧化功效,筛选抗氧化活性产物;通过急性、慢性毒性实验,评价高抗氧化活性反应产物的安全性。最终实现安全的、高活性的茶黄素产物的体外定向生物转化。

结项摘要

本研究运用单宁酶的水解催化特性,系统研究了反应参数(酶、温度、底物、反应时间)对酯型儿茶素含量变化及简单儿茶素生成量的影响。通过设计正交试验,筛选优化的单宁酶-茶多酚水解体系,获得了可用于调控成分比例的水解动力学方程,实现茶多酚底物组成的定向调控。应用上述反应产物,研究多酚氧化酶、过氧化物酶及儿茶素底物体外合成茶黄素的反应机制。研究结果明确了多酚氧化酶对茶多酚底物亲和性优于过氧化物酶;过氧化物酶对茶黄素底物的亲和性优于茶多酚底物,因此要定向生物合成茶黄素应避免过氧化物酶的消极作用。四种儿茶素底物中EGCG与酶的亲和性最高,与茶黄素单体TF3的高形成量相关;通过调控简单儿茶素EC和EGC的比例,获得相应的TF1产物,可望实现TF1的体外高效生物合成。利用大孔树脂和半制备色谱技术可以高效、快速地分离制备高纯度茶黄素单体,该方法可进一步放大并用于大规模生产。此外,通过四种茶黄素单体体外清除活性氧自由基的能力及抗DNA氧化损伤的功能研究,阐明了茶黄素单体的构效关系。本项目研究结果为茶黄素在医药、保健品等领域的广泛应用提供了理论和实验依据。

项目成果

期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
ISOLATION AND PURIFICATION OF FOUR INDIVIDUAL THEAFLAVINS USING SEMI-PREPARATIVE HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY
使用半制备高效液相色谱分离和纯化四种茶黄素
  • DOI:
    10.1080/10826076.2010.526865
  • 发表时间:
    2010-11
  • 期刊:
    JOURNAL OF LIQUID CHROMATOGRAPHY & RELATED TECHNOLOGIES
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    Xu, Yi;Jin, Yuxia;Wu, Yuanyuan;Tu, Youying
  • 通讯作者:
    Tu, Youying
Evaluation of the antioxidant effects of four main theaflavin derivatives through chemiluminescence and DNA damage analyses
通过化学发光和DNA损伤分析评估四种主要茶黄素衍生物的抗氧化作用
  • DOI:
    10.1631/jzus.b1100041
  • 发表时间:
    2011-09-01
  • 期刊:
    JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY-SCIENCE B
  • 影响因子:
    5.1
  • 作者:
    Wu, Yuan-yuan;Li, Wei;Tu, You-ying
  • 通讯作者:
    Tu, You-ying
茶黄素抑菌作用的研究
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    中国食品学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    金恩惠;吴媛媛;屠幼英
  • 通讯作者:
    屠幼英

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其他文献

地方小吃空间扩散格局与模式——基于中国四大知名地方小吃POI数据的研究
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
    吴媛媛
佩尔地平改善重度子痫前期母儿预后的临床研究
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  • 发表时间:
    2012
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
    吴媛媛
基于非因果信号处理的分数阶次低通滤波器
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  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
    王修君
疼痛动物模型中痛情绪量化评价方法
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  • 发表时间:
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  • 作者:
    吴媛媛;王珏;刘昀;刘艳琴;孙秀珍
  • 通讯作者:
    孙秀珍

其他文献

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吴媛媛的其他基金

茶叶酰基化黄酮苷合成关键酶鉴定及其调控的分子机制研究
  • 批准号:
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  • 批准年份:
    2023
  • 资助金额:
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相似国自然基金

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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