基于三维同步荧光的液态乳多种抗生素残留的快速同时检测

乳制品的抗生素残留超标既给消费者健康带来了潜在威胁，又限制了我国畜产品的出口贸易。现有抗生素残留的检测方法需要经过复杂的前处理过程，具有很大的局限性。本项目拟应用三维同步荧光技术和先进的化学计量学手段建立液态奶中多种抗生素残留的快速同时检测方法。三维同步荧光技术可为化学计量学提供矩阵响应数据阵，而二阶校正法等化学计量学方法可排除液态奶中干扰物质的影响，实现对多种抗生素残留的定量分析。本项目拟以三类含荧光基团的抗生素（四环素类、磺胺类和氟喹诺酮类）为研究对象，对添加这三种抗生素的液态奶进行三维同步荧光扫描。然后从二阶校正法中（平行因子分析、交替三线性分解算法等）选择最优化的算法对荧光谱图进行解析，建立液态奶中四环素类、磺胺类和氟喹诺酮类抗生素的快速同时检测方法。本项目的完成将简化抗生素残留检测的操作步骤，提高检测效率,有助于提高我国动物产品的国际竞争力，保障我国水产畜牧业的健康持续发展。

本项目建立了水溶液模型体系中四环素类、磺胺类和氟喹诺酮类抗生素残留的快速检测方法。并在此基础上建立了液态奶中四环素类、磺胺类和氟喹诺酮类抗生素残留的快速检测方法。所建立的磺胺类抗生素的检测方法中，PLSDA模型能够实现对牛奶样品的快速地筛选，其假阴性概率为3.12%；PLS模型可以实现对抗生素残留的定量检测，回收率为87.9% - 120.1%，检测限为2.54 μg/L，定量限为5.07μg/L。所建立的氟喹诺酮类抗生素的快速检测方法中，PLSDA模型可以正确地筛分出阴性样品和阳性样品，灵敏度达到100%；PLS模型预测样品单诺沙星（DANO）抗生素含量，回收率为88% - 114.4%，最低检出限为0.246 μg/L。在建立四环素抗生素的快速检测方法时，采用乙腈-醋酸缓冲液去除蛋白，加入CTAB后可以使四环素荧光强度与浓度之间达到很好的相关性。但是由于四环素类抗生素只有在碱性环境中才能显现出特定的荧光峰，与其它两类抗生素所需的酸性环境相异，故无法与其它两类抗生素进行同时检测。. 在抗生素独立检测方面的基础上，建立了液态奶中多种氟喹诺酮类抗生素、磺胺类与氟喹诺酮类抗生素残留的快速同时检测方法。在多种氟喹诺酮类抗生素同时检测的方法中，PLSDA模型可以正确地判别出样品中DANO的残留情况，而氟甲喹（FLU）的假阳性误判率为7.5%；利用PLS模型对两种抗生素进行定量预测时，DANO和FLU的回收率分别为81.1%-111%和87.1%-116%，最低检测限分别为0.25 μg/L和0.56 μg/L。在磺胺类与氟喹诺酮类抗生素残留的快速同时检测方法中，磺胺甲基异恶唑的判别正确率为100%。而达诺沙星的假阴性误判概率为1.78%；用PLS模型可以实现对两种抗生素残留的同时定量检测，磺胺甲基异恶唑的回收率为84.5-108.5%，方法检测限和定量限分别为103μg/L和106 μg/L，方法的重复性和重现性分别为0.6%和1.7%；达诺沙星的回收率为66.8-153.0%，方法检测限和定量限分别为36 and 41 μg/L，方法的重复性和重现性分别为1.3%和11.4% 。. 综上所述，已建立一种牛奶中磺胺甲基异恶唑和达诺沙星残留的快速同时检测方法。这项技术可用于快速筛选牛奶中磺胺甲基异恶唑和达诺沙星残留量是否达到规定的最大残留量。

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