DYNAMIC REGULATION OF ADHESIVE FORCES MEDIATED BY AIBB3

AIBB3 介导的粘附力的动态调节

基本信息

批准号：
6527514
负责人：
INGRID STUIVER
金额：
$ 10.33万
依托单位：
MICROISLET, INC.
依托单位国家：
美国
项目类别：
财政年份：
1998
资助国家：
美国
起止时间：
1998-09-30 至 2003-08-31
项目状态：
已结题

项目摘要

The integrin alphaIIbbeta3 is of key importance in the process of platelet thrombus formation, but the sequence of events that modulate its distinct functions on resting and activated platelets is not yet fully understood. The long term objective of this proposal is to gain insight into the dynamic regulation of the adhesive forces mediated by alphaIIbbeta3 under defined functional conditions. The first experimental model will evaluate receptor interaction with surface-bound ligand in a rapid (spin-on) adhesion assay not involving shear forces. Another method will measure directly the adhesive strength between a cell expressing recombinant alphaIIbbeta3 and a surface bound ligand using the single cell micropipette system. Lastly, the effects of varying shear forces on the functional state of alphaIIbbeta3 will be assessed using the parallel plate laminar flow model system. Recombinant expression of alphaIIbbeta3 on Chinese hamster ovary cells (A5 cells) will allow the detailed study of structure-function relationships by evaluating the effects of specific targeted mutations in relevant domains of the receptor. Moreover, the GP Ib-IX complex has been successfully coexpressed in the same cell with alphaIIbbeta3, thus making it possible to evaluate the synergistic role of these two receptors in supporting adhesion under high shear stress. Two external agonists, an activating monoclonal antibody (AP5 or anti-LIBS-6) and divalent ions, will be used to modulate different functional states of the receptor. To gain insight into the progression of alphaIIbbeta3 through its pathway of activation, the following specific aims are proposed: 1) To define the functional properties of each state of recombinant alphaIIbbeta3; 2) to examine the ligand binding specificities of this receptor with respect to immobilized and soluble ligands and discrete ligand domains; 3) to characterize the functional properties of the receptor under conditions of flow; 4) to establish the role of distinct domains of the receptor, such as cation binding sites, ligand binding sites and cytoplasmic tail sequences, in maintaining the distinct functional states of recombinant alphaIIbbeta3. The results obtained from these studies will contribute to elucidating the mechanism of alphaIIbbeta3 activation; this, in turn, will clarify an important aspect of platelet function during thrombogenesis.

整合素 αIIbbeta3 在这一过程中至关重要血小板血栓形成，但调节事件的顺序其对静息和活化血小板的独特功能尚未确定完全明白了。该提案的长期目标是获得深入了解粘合力的动态调节 αIIbbeta3 在确定的功能条件下。第一个实验模型将评估受体与表面结合的相互作用不涉及剪切力的快速（旋转）粘附测定中的配体。另一种方法是直接测量材料之间的粘合强度。表达重组αIIbbeta3和表面结合配体的细胞使用单细胞微量移液器系统。最后，效果 αIIbbeta3 功能状态上的不同剪切力将是使用平行板层流模型系统进行评估。 αIIbbeta3在中国仓鼠卵巢细胞中的重组表达（A5 细胞）将允许结构功能的详细研究通过评估特定目标突变的影响来建立关系在受体的相关域中。此外，GP Ib-IX 复合物具有已成功与 alphaIIbbeta3 在同一细胞中共表达，因此使得评估这两者的协同作用成为可能在高剪切应力下支持粘附的受体。两个外部激动剂、激活单克隆抗体（AP5 或抗 LIBS-6）和二价离子，将用于调节不同的功能状态受体。深入了解 alphaIIbbeta3 的进展通过其激活途径，以下具体目标是建议：1）定义每个状态的功能属性重组αIIbβ3； 2) 检查配体结合该受体在固定化和可溶性方面的特异性配体和离散配体结构域； 3）表征函数流动条件下受体的特性； 4）建立受体不同结构域的作用，例如阳离子结合位点，配体结合位点和细胞质尾序列，以维持重组αIIbbeta3的不同功能状态。结果从这些研究中获得的结果将有助于阐明其机制 αIIbbeta3 激活；这反过来又将澄清一个重要的问题血栓形成过程中血小板功能的一个方面。

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

How soon should we start interventional feeding in the ICU?

我们应该多久开始在 ICU 进行介入喂养？

DOI：
发表时间：
2014-03
期刊：
影响因子：
2.5
作者：
Fremont, Richard D;Rice, Todd W
通讯作者：
Rice, Todd W

Critical illness from 2009 pandemic influenza A virus and bacterial coinfection in the United States.

2009 年美国大流行甲型流感病毒和细菌双重感染造成的危重疾病。

DOI：
发表时间：
2012-05
期刊：
影响因子：
8.8
作者：
Rice, Todd W;Rubinson, Lewis;Uyeki, Timothy M;Vaughn, Frances L;John, Benjamin B;Miller 3rd, Russell R;Higgs, Elizabeth;Randolph, Adrienne G;Smoot, B Elizabeth;Thompson, B Taylor;NHLBI ARDS Network
通讯作者：
NHLBI ARDS Network