HORMONAL AND IONIC CONTROL OF METABOLISM
新陈代谢的激素和离子控制
基本信息
- 批准号:3432696
- 负责人:
- 金额:$ 2.37万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:
- 财政年份:1993
- 资助国家:美国
- 起止时间:1993-09-30 至 1995-09-29
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:3T3 cells affinity chromatography calcium flux carbachol cations cell cycle clone cells cyclic AMP diacylglycerols enzyme activity fatty acids forskolin gas chromatography hormone regulation /control mechanism ionophores isoproterenol liposomes liver metabolism phorbols platelet derived growth factor protein kinase C thin layer chromatography transfection
项目摘要
Diacylglycerol (DG) plays an important role as a second messenger. Major
advances have taken place in understanding its generation. Its further
metabolism is less well understood. Using new methods for incorporating
labeled DGs in the plasma membrane (PM) of resting NIH 3T3 cells, new
metabolic patterns for DGs were found in which conversion to
phosphatidylcholine (PC) is a key event, indicating that DGs translocate
from the PM to intracellular sites. This project will extend these
studies to activated NIH 3t3 cells. Specifically, the research will
examine: 1) Effects of exposure to different pharmacological agents on
the patterns of conversions of exogenous radiolabeled DGs, to detect
cross-talk interactions between different signalling systems at the level
of DG metabolism. The agents to be tested are: forskolin, which raises
cellular cAMP levels, Ca++ ionophores, which elevate cytoplasmic Ca++
concentrations, and phorbol esters and mezerein, which activate protein
kinase C. Cells will be labeled with exogenous DGs via liposomes and
exposed for different times to the agents; cellular lipids will be
analyzed by TLC and conversions determined by radioactivity measurements.
The data will be compared with experiments of the same kind in which the
cells will be exposed to one of three agonists: carbachol, isoproterenol
or platelet derived growth factor. 2) Changes in endogenous DG content
and fatty acid composition will be determined under the same conditions
by a DG binding proteins in the cytosol of NIH 3T3 cells and rat liver.
Three approaches will be used: i) An assay will be developed bases on
existing methods for other ;lipid ligands. ii) Using conventional and
affinity chromatography purification procedures, it will determined if
DG binding activity (DGBA) can be separated or coelutes with either fatty
acid binding proteins (FABPs) or sterol carrier protein 2 (SCP-2). DGBA
associated with pure samples of liver-FABP, intestine-FABP and SCP-2 will
be studied. iii) the role of liver FABP in DG metabolism will be
investigated, using a transfected cell line that expresses this protein
in high amounts. Exogenous and endogenous DG metabolism will be compared
in transfected and control cultures. These studies will help to clarify
basic aspects of the metabolism of a second messenger involved in
critical cell functions as secretion, contraction and proliferation.
二酰基甘油(DG)作为第二信使发挥着重要作用。 主要的
对它的产生的理解已经取得了进展。 其进一步
新陈代谢尚不清楚。 使用新方法进行合并
静息 NIH 3T3 细胞质膜 (PM) 中标记的 DG,新
发现 DG 的代谢模式,其中转化为
磷脂酰胆碱 (PC) 是一个关键事件,表明 DG 易位
从 PM 到细胞内位点。 该项目将扩展这些
对激活的 NIH 3t3 细胞的研究。 具体来说,该研究将
检查: 1) 暴露于不同药物的影响
外源放射性标记 DG 的转化模式,以检测
不同信号系统之间的串扰交互
DG 代谢。 待测试的药物是:毛喉素,它会提高
细胞 cAMP 水平、Ca++ 离子载体,可提高细胞质 Ca++
浓度、佛波酯和 mezerein,可激活蛋白质
激酶 C。细胞将通过脂质体用外源 DG 进行标记,
暴露于试剂不同的时间;细胞脂质将
通过 TLC 进行分析,并通过放射性测量确定转化率。
数据将与同类实验进行比较
细胞将暴露于三种激动剂之一:卡巴胆碱、异丙肾上腺素
或血小板衍生生长因子。 2)内源DG含量的变化
脂肪酸组成将在相同条件下测定
NIH 3T3 细胞和大鼠肝脏细胞质中的 DG 结合蛋白。
将使用三种方法: i) 将根据
其他脂质配体的现有方法。 ii) 使用常规和
亲和层析纯化程序,将确定是否
DG 结合活性 (DGBA) 可以与任一脂肪分离或共洗脱
酸结合蛋白 (FABP) 或甾醇载体蛋白 2 (SCP-2)。 十二烷基苯磺酸钠
与肝脏-FABP、肠道-FABP 和 SCP-2 的纯样本相关
被研究。 iii) 肝脏 FABP 在 DG 代谢中的作用将是
研究人员使用表达该蛋白质的转染细胞系
大量。 外源性和内源性DG代谢将进行比较
在转染和对照培养物中。 这些研究将有助于澄清
参与第二信使新陈代谢的基本方面
关键细胞的功能包括分泌、收缩和增殖。
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
HOWARD RASMUSSEN其他文献
HOWARD RASMUSSEN的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('HOWARD RASMUSSEN', 18)}}的其他基金
CORE--CELL BIOLOGY AND IMMUNOBIOLOGY FACILITY
核心--细胞生物学和免疫生物学设施
- 批准号:
6239092 - 财政年份:1997
- 资助金额:
$ 2.37万 - 项目类别:
相似国自然基金
Mpro蛋白靶向亲和层析定向挖掘白及属中药抗新冠肺炎活性芪类成分
- 批准号:
- 批准年份:2022
- 资助金额:33 万元
- 项目类别:地区科学基金项目
原子水平一体化构建腺相关病毒亲和层析介质及分子设计基础
- 批准号:
- 批准年份:2020
- 资助金额:63 万元
- 项目类别:面上项目
基于凝集素芯片与凝集素亲和层析技术的参芪扶正注射液联合 IFN-α对肝癌切除术后复发转移干预机制的糖蛋白组学研究
- 批准号:81803954
- 批准年份:2018
- 资助金额:23.0 万元
- 项目类别:青年科学基金项目
基于生物质谱和亲和层析策略的大肠杆菌O157: H7特异性抗体的靶蛋白及多肽抗原表位的鉴定与研究
- 批准号:31701680
- 批准年份:2017
- 资助金额:25.0 万元
- 项目类别:青年科学基金项目
治疗SLE复方中的抗炎物质分离及对狼疮活动干预机制的研究
- 批准号:81673857
- 批准年份:2016
- 资助金额:55.0 万元
- 项目类别:面上项目
相似海外基金
The role of CDPKs in calcium sensing and ABA signaling
CDPK 在钙传感和 ABA 信号传导中的作用
- 批准号:
6790273 - 财政年份:2004
- 资助金额:
$ 2.37万 - 项目类别:
The role of CDPKs in calcium sensing and ABA signaling
CDPK 在钙传感和 ABA 信号传导中的作用
- 批准号:
6875718 - 财政年份:2004
- 资助金额:
$ 2.37万 - 项目类别:
The role of CDPKs in calcium sensing and ABA signaling
CDPK 在钙传感和 ABA 信号传导中的作用
- 批准号:
7048642 - 财政年份:2004
- 资助金额:
$ 2.37万 - 项目类别: