細胞外小胞が内包する分子の動態解明と新しい牛伝染性リンパ腫モニタリング技術の開発

阐明细胞外囊泡中分子的动态并开发牛传染性淋巴瘤的新监测技术

基本信息

批准号：
22KF0161
负责人：
猪島康雄
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KF0161/
关键词：
細胞外小胞牛伝染性リンパ腫 BLV EBL モニタリング

项目摘要

牛伝染性リンパ腫（EBL）は、牛伝染性リンパ腫ウイルス（BLV）感染を原因とし、いまだ発症要因は解明されていない。毎年発症頭数が増加しており、大きな経済的損失をもたらしている。本研究では、牛の生乳と血液に含まれる細胞外小胞（EV）に着目した。EVは、あらゆる細胞から分泌され、宿主の生体環境を反映してEVが内包する分子の種類と量が変動することが知られており、ヒトではがん診断に活用されている。EBLは牛のB細胞性リンパ腫、血液のがんであることから、EV内の分子を網羅的に解析し、内包分子がリンパ腫発症までの過程でどのような動態を示すのか解明し、新しいEBLのモニタリング技術の確立を目指す。本年度は、以下の研究を進めた。①大学附属の酪農場、民間の酪農場、と畜場で、BLV感染牛、およびEBLと診断されたEBL発症牛から生乳と血液を収集した。同様にBLVに感染していない健康牛からも生乳と血液を収集した。②生乳と血液中のEVを分離・精製後、内包する核酸（mRNA、miRNA）を抽出し、マイクロアレイ、ジーンチップを用いて網羅的比較解析を実施した。その結果、以下の研究成果を得た。BLV感染量を定量し、感染初期、中期、後期に分類した。BLVに感染していない健康牛の生乳EV内包分子と比較し、感染後期牛の生乳EVで有意に増加するmiRNAを複数種類同定できた。また、それらのmiRNAを検出するためのリアルタイムPCR検出系の確立に一部成功した。さらにEBL発症牛の生乳EV内で有意に増加するmRNA、およびmiRNAを複数種類同定することができた。同様に、それらのmRNA、miRNAを検出するためのリアルタイムPCR検出系の確立に一部成功した。

传染性牛淋巴瘤（EBL）是由传染性牛淋巴瘤病毒（BLV）感染引起的，其病因尚不清楚。受感染的动物数量逐年增加，造成巨大的经济损失。在这项研究中，我们重点关注牛奶和血液中含有的细胞外囊泡（EV）。 EV由所有细胞分泌，众所周知，EV中所含分子的类型和数量会根据宿主的生物环境而变化，并用于人类癌症诊断。由于EBL是牛B细胞淋巴瘤和血癌，我们将全面分析EV内部的分子，阐明其在淋巴瘤发展过程中的内部分子动态，旨在建立监测技术。今年，我们开展了以下研究。 ① 原奶和血液采集自大学附属奶牛场、私营奶牛场和屠宰场的感染 BLV 的奶牛和诊断为 EBL 的 EBL 奶牛。未感染 BLV 的健康奶牛也采集了生奶和血液。 ②分离纯化原料奶和血液中的EV后，提取其中的核酸（mRNA、miRNA），利用微阵列和基因芯片进行综合比较分析。结果，我们获得了以下研究结果。对BLV感染剂量进行量化，并将其分为感染早期、中期和晚期。我们能够识别出多种类型的 miRNA，与未感染 BLV 的健康奶牛的生奶 EV 分子相比，感染后期奶牛的生奶 EV 分子显着增加。我们还部分成功地建立了实时PCR检测系统来检测这些miRNA。此外，我们能够识别出多种类型的 mRNA 和 miRNA，这些 mRNA 和 miRNA 在患有 EBL 的奶牛的原奶 EV 中显着增加。同样，我们已经部分成功地建立了实时PCR检测系统来检测这些mRNA和miRNA。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

牛伝染性リンパ腫発症を反映する血液エクソソーム内包miRNAバイオマーカーの探索

寻找反映牛传染性淋巴瘤发病的血液外泌体封装的 miRNA 生物标志物

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
高田秋音;松橋珠子;岡田彩加;猪島康雄
通讯作者：
猪島康雄

リアルタイムPCRのノーマライゼーションに用いる牛乳エクソソーム中の内在性コントロールmiRNAsの同定

鉴定乳汁外泌体中的内源对照 miRNA，以实现实时 PCR 标准化

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
エムディマティウルラハマン; 中西諒花; 塚田文; 清水薫; 岡田彩加; 猪島康雄
通讯作者：
猪島康雄

Characterization of miRNAs in Milk Small Extracellular Vesicles from Enzootic Bovine Leukosis Cattle

地方性牛白血病牛乳小细胞外囊泡中 miRNA 的表征

DOI：
10.3390/ijms231810782
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
5.6
作者：
Tsukada Fumi;Takashima Shigeo;Wakihara Yoshiko;Kamatari Yuji O.;Shimizu Kaori;Okada Ayaka;Inoshima Yasuo
通讯作者：
Inoshima Yasuo

血液エクソソームにおける牛伝染性リンパ腫発症を反映するmiRNAバイオマーカーの探索

在血液外泌体中寻找反映牛传染性淋巴瘤发展的 miRNA 生物标志物