微小管ダイナミクスに着目した食道癌の新規治療法開発

开发关注微管动力学的食管癌新治疗方法

• 批准号: 22K08848
• 负责人: 藤原 義之
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08848/
• 关键词: 食道がん; 新規抗がん剤; 微小管; 光線力学的治療; 食道癌; 胃癌; 微小管重合; 新規化合部; 抗がん剤

新規化合物Tau由来ペプチド（以下TP)、およびTPに光反応基であるジアリン構造を結合させたTP（以下DA-TP)を用い、食道がん細胞株KYSE-30、KYSE-510、TE-4，TE-8の増殖抑制実験を行った。DA-TPを0, 0.1, 1, 5, 10, 20μMと加えていくと食道がん細胞は容量依存的に増殖が抑制された。さらにこの増殖抑制効果は紫外線照射により増強された。この効果は紫外線照射による微小管とDA-TPとの共有結合により微小管重合の安定化によるものと考えられた。このUVによる微小管の安定化は、HepG2細胞を用いたin-vitro微小管染色により確認済みである。現在、愛媛大学今村健志教授の研究グループとの共同研究にて、DA-TPと微小管との結合と微小管の形態変化を共焦点イメージングにて確認する作業を施行中である。さらに、DA-TP投与による細胞周期の変化をフローサイトメトリーにて確認中であり微小管重合促進による細胞抑制効果であることを確認中である。これらのin vitro実験を踏まえて、食道がん細胞皮下xenograftモデルマウスを用いて、TP及びDA-TPの腹腔内投与、静脈内投与を行い、腫瘍の大きさ・重量を比較し治療効果と安全性を検証する。さらに紫外線照射を追加することによる抗腫瘍効果の増強効果を確認する。これらの実験により、食道がんの新たな治療戦略として、DA-TPによる微小管重合促進による抗腫瘍効果とさらに紫外線照射併用による増強効果、が選択肢の一つとなることが発信できる。

利用新化合物Tau衍生肽（以下简称TP）和TP上附着有光反应基团二胺结构的TP（以下简称DA-TP），我们开发了食道癌细胞系KYSE -30、KYSE-510和TE-4，进行了TE-8的增殖抑制实验。当添加0、0.1、1、5、10和20μM的DA-TP时，食管癌细胞的增殖以剂量依赖性方式受到抑制。此外，紫外线照射增强了这种抗增殖作用。这种效应被认为是由于紫外线照射下微管和 DA-TP 之间的共价键合使微管聚合稳定化所致。使用 HepG2 细胞进行体外微管染色已证实紫外线对微管的稳定作用。目前，我们正在与爱媛大学今村健二教授的研究小组合作，利用共聚焦成像来确认DA-TP与微管的结合以及微管形态的变化。此外，目前正在通过流式细胞术确认给予DA-TP引起的细胞周期的变化，目前正在确认细胞抑制效果是由于促进微管聚合而产生的。基于这些体外实验，我们使用食管癌细胞皮下异种移植模型小鼠进行TP和DA-TP的腹腔内和静脉内给药，并比较肿瘤大小和重量以评估治疗效果和验证性别。此外，我们还将通过添加紫外线照射来确认抗肿瘤效果的增强效果。这些实验表明，DA-TP促进微管聚合的抗肿瘤作用和紫外线照射的增强作用可以作为食管癌的新治疗策略。