自己脂肪由来インスリン産生細胞自家移植における抗原性発現と細胞運命の研究

自体脂肪来源的胰岛素生成细胞移植物中抗原表达和细胞命运的研究

基本信息

批准号：
22K08734
负责人：
池本哲也
金额：
$ 2.75万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08734/
关键词：
脂肪由来幹細胞 insulin-producing cell 1型糖尿病自己免疫細胞運命

项目摘要

本研究は、自己幹細胞から分化誘導された人工β細胞が、本来のβ細胞に対する自己免疫疾患（1型糖尿病）の患者に移植された際にどのような細胞運命を辿るか、という科学的問いに端を発している。本研究の基となるコンセプト（自己脂肪由来の脂肪由来幹細胞:ADSCから分化誘導されたinsulin producing cell: IPC移植）は、１型糖尿病患者に対する大きな福音となる可能性がある一方で、アロ移植免疫から免れたとしても、人工細胞であるために、自然免疫に排除されたり、自己免疫によって破壊を受ける可能性は残る。この状況を検討するにあたり、Auto-transplantationモデルとして、1型糖尿病自己免疫疾患モデルマウス（NODマウス）を用い、糖尿自然発症したマウスの皮下脂肪からADSCを分離精製し、NOD-IPCを作成する。マウス血糖を正常化するのに十分なNOD-IPC(2.0 x 10^6個)を1型糖尿病自然発症したマウスの腎被膜下へ移植し、全身状態および血糖を測定し、血糖正常化が得られた個体は30日で移植腎の摘出を行い、血糖の再上昇を確認し、組織学的検討を行った。更に、長期間（60日）の観察と血糖変動を測定し、その後経時的に犠死を行い、graftに対しては抗インスリン抗体、PDL1発現、ZnT8発現・リンパ球浸潤の発現等を計測した。その結果、移植されたNOD-IPCはアロ移植免疫によるgraft排除は考慮しなくてよいものの、長期（移植後60日）になると移植されたNOD-IPCはリンパ球浸潤を受け、インスリン発現量も低下することから、インスリン分泌能を消失する可能性が示唆された。これらの検討結果は、IPCの1型糖尿病患者自己移植を臨床応用する際に非常に重要である。

这项研究的目的是回答这样一个科学问题：当将自体干细胞诱导分化的人工β细胞移植到患有影响原始β细胞的自身免疫性疾病（1型糖尿病）的患者体内时，会发生什么样的细胞命运它起源于。这项研究所基于的概念（移植由自体脂肪衍生的脂肪干细胞（ADSC）分化而来的胰岛素产生细胞（IPC））有可能为 1 型糖尿病患者带来巨大的福祉，而同种异体移植免疫即使它们幸免于难，因为它们是人造细胞，仍然有可能被自然免疫消灭或被自身免疫破坏。为了研究这种情况，我们将使用1型糖尿病自身免疫性疾病模型小鼠（NOD小鼠）作为自体移植模型，从自发患糖尿病的小鼠的皮下脂肪中分离和纯化ADSC，并创建NOD-IPC。将足以使小鼠血糖正常化的NOD-IPC（2.0 x 10^6细胞）移植到自发患上1型糖尿病的小鼠的肾被膜下，并测量一般状况和血糖，结果显示，确认血糖已正常化，30天后取出移植肾，确认血糖水平再次上升，并进行组织学检查。此外，我们进行长期观察（60天）并测量血糖波动，然后随时间推移处死动物，并测量抗胰岛素抗体的表达、PDL1表达、ZnT8表达、淋巴细胞浸润等。因此，由于同种异体移植免疫，移植的NOD-IPC不需要考虑移植消除，但从长远来看（移植后60天），移植的NOD-IPC会发生淋巴细胞浸润，胰岛素表达水平降低。减少提示胰岛素分泌能力丧失的可能性。这些研究结果对于IPC自体移植治疗1型糖尿病患者的临床应用具有重要意义。