Fork Reversal因子POLD4を指標とした新規肺癌分子標的治療法の開発

以叉逆转因子POLD4为指标开发肺癌新型分子靶向治疗

基本信息

批准号：
22K07263
负责人：
新美敦子
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Fujita Health University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07263/
关键词：
POLD4 複製ストレスゲノム不安定化

项目摘要

肺癌は年間死亡者数が癌腫中で第一位であり、発癌過程の解明、予防、治療法の開発が強く望まれている。これまでに申請者らは臨床検体と培養細胞双方から肺癌の組織型特徴的な遺伝子発現プロファイルに注目し、新規発癌メカニズムの提唱や分子標的候補の提案を行ってきた。この過程で従来DNA複製因子として報告されていたDNAポリメラーゼδ複合体サブユニットPOLD4、がFork Reversal開始機能を有する可能性を明らかにした。本研究では新規Fork Reversal開始因子POLD4の癌病理における分子機構を明らかにし、この経路を標的とした新たな肺癌治療法の開発を目指す。本年度は、細胞生物学な実験として、主にDNAファイバー法を用いた解析と各種抗癌剤の至適条件検討を行った。DNAファイバー法を用いた解析では、既に報告のあるFork Reversal開始因子のノックダウンをA549細胞及びPOLD4ノックアウト（KO）A549細胞に対して行い、Fork Reversal活性を調べることでPOLD4がこの経路において機能的相互作用を持つ因子の同定を試みた。各種抗癌剤の至適条件の検討においては、コロニーフォーメーションアッセイを行って、POLD4発現量依存的に感受性が変化する薬剤やその組み合わせの同定を行った。また、PDXマウスモデルを用いた検証については、予備実験としてin situ RNAハイブリダイゼーションによる肺癌臨床検体のPOLD4発現量の測定を試みた。CDXマウスモデルを用いた解析については、研究分担者・竹内博士の協力の下、A549細胞及びA549 POLD4 KO細胞の皮下注射による腫瘍形成能の確認を行った。

肺癌是癌症中每年死亡人数最高的癌症，人们迫切希望阐明其致癌过程并开发预防和治疗方法。迄今为止，申请人专注于来自临床标本和培养细胞的肺癌组织类型特征的基因表达谱，并提出了新的致癌机制和候选分子靶点。在此过程中，我们发现POLD4（先前报道为DNA复制因子的DNA聚合酶δ复合物的一个亚基）可能具有分叉反转启动功能。在本研究中，我们旨在阐明新型Fork Reversal起始因子POLD4在癌症病理学中的分子机制，并开发针对该途径的新肺癌治疗方法。今年，作为细胞生物学实验，我们主要使用DNA纤维法进行分析，并检查各种抗癌药物的最佳条件。在使用DNA纤维法的分析中，我们对A549细胞和POLD4敲除（KO）A549细胞中先前报道的Fork Reversal起始因子进行了敲低，并检查了Fork Reversal活性以确认POLD4在该途径中发挥功能进行了尝试。以确定相互作用的因素。在检查各种抗癌药物的最佳条件时，进行了集落形成测定，以确定其敏感性根据 POLD4 表达量而变化的药物及其组合。关于使用PDX小鼠模型的验证，我们尝试通过原位RNA杂交测量临床肺癌标本中POLD4的表达水平作为初步实验。关于使用CDX小鼠模型的分析，在共同研究员Takeuchi博士的合作下，我们通过皮下注射证实了A549细胞和A549 POLD4 KO细胞的成瘤能力。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

LASP1 tethers CERS6 at lamellipodia and promotes cancer cell migration

LASP1 将 CERS6 束缚在片状伪足上并促进癌细胞迁移

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Siripan Limsirichaikul; Atsuko Niimi; Toshiyuki Takeuchi; Yasuyoshi Mizutani; Patinya Sawangsri; Tran Quoc Dat; Motoshi Suzuki
通讯作者：
Motoshi Suzuki

POLD4-dependent DDR pathway may be targeted in non-small cell lung cancer

POLD4依赖性DDR通路可能是非小细胞肺癌的靶点

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Atsuko Niimi; Siripan Limsirichaikul; Patinya Sawangsri; Tran Quoc Dat; Yasuyoshi Mizutani; Toshiyuki Takeuchi; Motoshi Suzuki
通讯作者：
Motoshi Suzuki

Functional analysis of YBX1 in PD-L1 expression in lung cancer

YBX1在肺癌PD-L1表达中的功能分析

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yasuyoshi Mziutani; Toshiyuki Takeuchi; Atsuko Niimi; Siripan Limsirichaikul; Patinya Sawangsri; Tran Quoc Dat; Ken
通讯作者：
Ken

藤田医科大学　分子腫瘍学講座

藤田保健大学分子肿瘤学系