The role of vitamin D receptor of hepatic immune cells in the pathogenesis of nonviral liver disease

肝免疫细胞维生素D受体在非病毒性肝病发病机制中的作用

基本信息

批准号：
22K06919
负责人：
槇島誠
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06919/
关键词：
ビタミンD受容体肝臓炎症免疫細胞肝障害代謝

项目摘要

本研究課題では、研究代表者らが先行研究において見出した、ビタミンD受容体(VDR)の欠損マウスにおいて肝臓に常在するKupffer細胞や好中球などの免疫細胞の機能や肝炎の病態が変化する、という知見に基いてさらに解析を進めることで、VDRによる肝臓免疫制御メカニズムを解明する。本年度は以下の項目について検討した。１．野生型マウス及び全身性VDR欠損マウスにおいて、リポ多糖、CpG-DNA、α-ガラクトシルセラミド、コンカナバリンA（Con-A）による肝炎モデルを比較したところ、Con-A肝炎にてVDR欠損の影響が最も大きく見られることを確認した。VDR欠損によるCon-A肝炎減弱効果のメカニズム解明に焦点を絞った。２．Con-A投与6時間後に単離した肝臓免疫細胞を用いてRNAシーケンス解析を行った。Con-A投与により多数の遺伝子の発現変化を認めたが、肝炎の病態と相関するVDR欠損による影響は見られなかった。３．フローサイトメトリーを用いた免疫細胞分布の解析を行った。Con-A投与6時間及び24時間後には野生型マウスは一過性に血中トランスアミナーゼ値の増加を認めるが、全身性VDR欠損マウスでは減弱することを確認した。しかし、予想に反して免疫細胞分布に変化は認めなかった。VDR欠損マウスにおいても野生型マウスと同様に、Con-Aによる遺伝子発現変化及び免疫細胞の分布の変化が起こることから、VDR依存性の選択的な免疫細胞の機能発現が考えられた。４．VDR依存性の免疫細胞の機能発現を詳細に解析するため、Cre-LoxP系を用いたKupffer細胞、ミエロイド系細胞及び肝細胞特異的VDR欠損マウスを樹立した。以上の結果より、VDRはCon-A誘導性肝炎の病態に関与するが、選択的な免疫細胞の機能発現を介することが考えられ、詳細な解析を進めている。

在这个研究项目中，首席研究员和他的同事在之前的研究中发现，维生素D受体（VDR）缺陷小鼠中肝脏中的库普弗细胞和中性粒细胞等免疫细胞的功能以及肝炎的病理学发生了改变。在此基础上进一步分析，我们将阐明VDR调节肝脏免疫的机制。今年，我们考虑了以下事项。 1.当我们在野生型小鼠和全身性 VDR 缺陷小鼠中比较使用脂多糖、CpG-DNA、α-半乳糖神经酰胺和刀豆球蛋白 A (Con-A) 的肝炎模型时，我们发现 VDR 缺陷对 Con-A 的影响最大我确认它看起来很棒。我们的重点是阐明 VDR 缺陷减弱 Con-A 肝炎的机制。 2.使用Con-A施用后6小时分离的肝脏免疫细胞进行RNA序列分析。尽管在给予Con-A后观察到许多基因表达的变化，但没有观察到与肝炎病理学相关的VDR缺乏的影响。 3.使用流式细胞术分析免疫细胞分布。给予Con-A后6小时和24小时，野生型小鼠的血液转氨酶水平出现短暂升高，但在全身性VDR缺陷的小鼠中，这种情况被证实减弱。然而，与预期相反，免疫细胞分布没有观察到变化。与野生型小鼠类似，VDR缺陷小鼠中Con-A诱导的基因表达和免疫细胞分布发生变化，表明免疫细胞功能依赖于VDR选择性表达。 4.为了详细分析 VDR 依赖性免疫细胞的功能表达，我们使用 Cre-LoxP 系统建立了针对 Kupffer 细胞、骨髓细胞和肝细胞的 VDR 缺陷小鼠。基于上述结果，VDR参与了Con-A诱导的肝炎的病理学，但认为它是通过选择性免疫细胞功能表达介导的，详细分析正在进行中。