非硫酸化型HNK-1糖鎖による腎保護機構の解明と腎機能障害マーカーとしての展開

阐明非硫酸化 HNK-1 糖链的肾脏保护机制及其作为肾功能障碍标志物的开发

基本信息

批准号：
22K06126
负责人：
森瀬譲二
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06126/
关键词：
非硫酸化型HNK-1糖鎖腎機能障害

项目摘要

腎臓内糖鎖は様々な腎疾患に伴いその発現パターンが変化することから、その機能的役割の解明が重要な課題となる。特に非硫酸化HNK-1 (nonsulfated human natural killer-1; nsHNK-1)糖鎖は腎臓特異的な発現を示し、かつ尿中にも排泄される糖鎖抗原である。本研究はこのnsHNK-1糖鎖の腎臓における機能的役割およびその発現制御機構の解明を目指すとともに、腎機能障害の早期検出マーカーとしての可能性を探索するものである。本年度はまず、腎機能障害を早期検出するためのサンドイッチELISAの開発に取り組んだ。尿中nsHNK-1キャリア分子はmeprin αであることがわかっているため、抗meprin α抗体をプレートに固相化し、M6749抗体(抗nsHNK-1抗体)で定量的に検出する方法を試みた。マウス腎臓では老化とともにnsHNK-1発現量が増加することが知られていた一方で、尿中nsHNK-1量は20ヶ月齢より徐々に減少する傾向が新たにわかった。糸球体障害誘導マウスでは誘導3日目より尿中nsHNK-1量が増加した一方で、尿細管障害誘導マウスでは誘導1日目で大きく減少した後に徐々に回復するといった、各腎疾患特異的な尿中nsHNK-1量の変動パターンを捉えることに成功した。さらに糸球体障害誘導マウスおよび尿細管障害誘導マウス血中にもM6749抗体反応性の分子が検出されることが新規にわかった。したがって、本糖鎖抗原は尿だけでなく血中マーカーとしても有用であることが示唆された。

由于肾糖链的表达模式随各种肾脏疾病而变化，因此阐明其功能作用是一个重要问题。特别是，非硫酸化人类自然杀伤剂 1 (nsHNK-1) 糖链以肾脏特异性方式表达，并通过尿液排出。本研究旨在阐明nsHNK-1糖链在肾脏中的功能作用及其表达控制机制，并探讨其作为肾功能障碍早期检测标志物的潜力。今年，我们首先致力于开发用于早期检测肾功能障碍的夹心 ELISA。由于已知尿中的nsHNK-1载体分子是meprin α，因此我们尝试了将抗meprin α抗体固定在平板上并使用抗体M6749（抗nsHNK-1抗体）进行定量检测的方法。虽然已知小鼠肾脏中nsHNK-1的表达水平随着年龄的增长而增加，但新发现尿中nsHNK-1的量从20月龄开始趋于逐渐减少。在肾小球损伤诱导的小鼠中，尿中nsHNK-1水平从诱导第三天开始增加，而在肾小管损伤诱导的小鼠中，它们在诱导第一天显着下降，然后逐渐恢复。尿 nsHNK-1 水平。此外，新发现在肾小球损伤诱导小鼠和肾小管损伤诱导小鼠的血液中检测到与M6749抗体反应的分子。因此，表明该糖链抗原不仅可用作尿液标记物，而且还可用作血液标记物。