DNAマイクロアレイ解析で得た肺、副腎の低体温症マーカ―候補の法医実務応用

通过 DNA 微阵列分析获得的肺和肾上腺低温标记候选物的法医实际应用

• 批准号: 22K10619
• 负责人: 高宮 正隆
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10619/
• 关键词: 低体温症; 法医解剖; ELISA; タンパク

[目的・方法] 平成24～28年度にマウス低体温症モデルを用い肺、副腎のDNAマイクロアレイ解析で抽出した低体温症マーカー候補に関し、ヒト剖検例組織でのタンパクレベルでの発現をELISAを用いて定量し、法医実務応用の可能性を検討する。また研究代表者は法医学的新規バイオマーカーの選定に向けた戦略として「マーカー候補の抽出に向け、マウスを用いたトランスクリプトーム解析よる大規模遺伝子検索」と「法医実務応用に向け、ヒト剖検例組織を用いたマーカー候補のタンパクレベルでの発現定量」の組み合わせを模索しており、これら戦略の有用性を低体温症での検討を通し考察する。具体的には肺、副腎のマーカー候補に関して、1) 基礎データの獲得を目的にマウス低体温症モデルにおけるタンパクレベルでの発現定量を行い、2) 次いで実務応用を念頭にヒト剖検例組織でのタンパクレベルでの発現定量を行い、3) マウス組織とヒト組織の結果を比較し鑑定法を構築する。[実績]1) 岩手医科大学法医学分野における法医解剖で低体温症と診断された症例の肺、副腎を採取し、ヒト低体温症の検討症例を増やした。2) マウス低体温症モデルにおけるタンパクレベルでの発現定量をELISAで継続中である。なお各臓器のタンパク抽出方法の検討を含め予備実験に多くの時間を要したため、ヒト組織の検討を行うことはできなかったが、2023年度はヒト剖検組織のタンパクレベルでの発現定量を行う予定である。

[目的/方法] 对于2012年至2012年使用小鼠低温模型的肺和肾上腺DNA微阵列分析提取的低温标记候选物，我们使用ELISA测量了人体尸检组织中蛋白质水平的表达，并对结果进行量化。并考虑将它们应用于法医实践的可能性。首席研究员还提出了选择新型法医生物标志物的策略，包括“使用小鼠转录组分析进行大规模基因搜索以提取候选标志物”和“在法医学中实际应用的人体尸检案例”。我们正在探索这种组合“使用组织在蛋白质水平上量化候选标记物的表达”，并将通过低温检查讨论这些策略的有用性。具体来说，关于肺和肾上腺的候选标记物，我们将1）在小鼠低温模型中量化蛋白质水平的表达以获得基础数据，以及2）在考虑到实际应用的情况下量化人体尸检组织中的表达。蛋白质水平的表达，3）通过比较小鼠和人体组织的结果建立鉴定方法。 [成果] 1) 从岩手医科大学法医学系法医尸检中诊断为低体温的病例中采集肺和肾上腺，增加了研究人体低体温病例的数量。 2) 我们正在继续使用 ELISA 定量小鼠低温模型中蛋白质水平的表达。由于需要花费大量时间进行初步实验，包括检查每个器官的蛋白质提取方法，因此无法检查人体组织，但我们计划在 2023 年对人体尸检组织中蛋白质水平的表达进行定量。 。