γ-チューブリンを標的とした新規抗がん剤の創製研究

以γ-微管蛋白为靶点的新型抗癌药物的创制研究

• 批准号: 17J08509
• 负责人: 林 良樹
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J08509/
• 关键词: γ-チューブリン; ジケトピペラジン

γ-チューブリンへの親和性を有する新規抗がん剤創製の足がかりとして、本研究の端緒となったジケトピペラジン（DKP）誘導体KPU-406の構造を元に、以下の二つのアプローチに基づき誘導体合成を展開した。1. γ-チューブリンへの親和性発現に必須となる化学構造の探索：KPU-406の構造を元に、その部分構造からなる誘導体を合成した。加えて、KPU-406の化学構造のうち、4-メトキシフェニル構造の親和性に対する寄与を再検討するべく、高い殺細胞活性を示した2-ピリジル型誘導体KPU-300に着目し、種々の置換基を導入した誘導体を合成した。得られた各誘導体について、γ-チューブリンへの親和性、及び殺細胞活性を評価することでγ-チューブリンへの親和性発現に必須となる構造を特定し、強力なγ-チューブリン阻害剤の創製へとつながると期待している。2. γ-チューブリン親和性を有するケミカルプローブの創製：γ-チューブリンとKPU-406の結合様式の探索、並びにγ-チューブリン親和性を有する誘導体獲得に資する簡便なin vitro評価系への応用を目指し、KPU-406にビオチン構造を導入したケミカルプローブを合成した。今後、γ-チューブリンへの親和性評価ののち、分子内のベンゾフェノン構造を光反応基とした光反応によるγ-チューブリンへの共有結合的ラベル化とつづくMS/MS解析により結合部位の推定を進める。また、表面共鳴プラズモン（SPR）法にて本プローブをセンサーチップに固定化することで、γ-チューブリンへの親和性を示す化合物を簡便に探索可能なスクリーニング系の構築が可能となると考えている。

基于作为本研究起点的二酮哌嗪 (DKP) 衍生物 KPU-406 的结构，我们使用以下两种方法作为创建对 γ-微管蛋白衍生物具有亲和力的新型抗癌药物的垫脚石。合成被开发出来。 1.寻找表达γ-微管蛋白亲和力所必需的化学结构：基于KPU-406的结构，我们合成了由其部分结构组成的衍生物。此外，为了重新审视4-甲氧基苯基结构对KPU-406化学结构之间亲和力的贡献，我们重点关注表现出高细胞杀伤活性的2-吡啶基型衍生物KPU-300，并研究了各种合成了其中引入基团的衍生物。通过评估所获得的每种衍生物对γ-微管蛋白的亲和力和细胞杀伤活性，我们鉴定了表达对γ-微管蛋白的亲和力所必需的结构，并发现它是γ-微管蛋白的有效抑制剂，我们希望这将导致。到新药的创造。 2. 具有γ-微管蛋白亲和力的化学探针的创建：探索γ-微管蛋白与KPU-406的结合模式，并开发简单的体外评估系统，这将有助于获得具有γ-微管蛋白亲和力的衍生物以供应用。 ，我们合成了一种将生物素结构引入 KPU-406 的化学探针。今后，在评估与γ-微管蛋白的亲和力后，我们将利用分子中的二苯甲酮结构作为光反应基团，通过光反应共价标记γ-微管蛋白来估计结合位点，然后进行MS/MS分析。我们还相信，通过使用表面共振等离子体（SPR）方法将该探针固定在传感器芯片上，将有可能构建一个可以轻松搜索对γ-微管蛋白具有亲和力的化合物的筛选系统。