ウシの免疫抑制受容体の機能解析および難治性疾病の新規制御法への応用研究

牛免疫抑制受体功能分析及疑难病防治新方法的应用研究

基本信息

批准号：
13J01442
负责人：
岡川朋弘
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、ウシの免疫抑制受容体PD-1やLAG-3に対する分子標的薬を開発し、ウシ白血病ウイルス（BLV）感染症やヨーネ病をはじめとした難治性疾病に対する新規制御法を樹立することを目的としている。まず、昨年度までに樹立した発現細胞株を用いて、抗ウシPD-1治療用抗体および抗ウシLAG-3治療用抗体の大量生産を試みた。この結果、14 mgの抗PD-1抗体を産生させることに成功した。また、抗LAG-3抗体についても大量生産を現在進めている。次に、作製した抗PD-1治療用抗体の機能を評価した。まず、この治療用抗体のPD-1に対する結合親和性は、基にした抗PD-1ラット抗体と同等であることがわかった。また、この治療用抗体はPD-1とリガンドであるPD-L1の結合を阻害するブロック抗体の機能を示した。さらに、BLV感染牛を用いて抗ウシPD-1治療用抗体の臨床試験を実施した。抗PD-1治療用抗体を感染牛に投与し、その後の経過を観察した。抗体投与後、試験牛には特筆すべき臨床症状は認められなかった。また、投与した抗体は少なくとも投与後28日まで血清中から検出され、長い血中半減期を有することが示唆された。そして、抗PD-1抗体の投与によりBLV特異的CD4+ T細胞応答が活性化され、抗ウイルス効果が認められた。このように、抗ウシPD-1治療用抗体がBLV感染症の発症遅延に有効な治療薬となりうることが示唆された。また、本年度はこの他に、本制御法の適応範囲を広げるため、牛のアナプラズマ病における免疫抑制受容体の発現動態と機能を解析し、アナプラズマ病におけるT細胞の疲弊化にPD-1とLAG-3の発現上昇が関与することを示した。

在这项研究中，我们开发了用于洞穴免疫抑制受体PD-1和LAG-3的分子靶向药物，并建立了用于顽固性疾病（例如病毒病毒（BLV）感染）的新控制方法。首先，我们尝试使用去年确定的已建立的表达细胞的抗腹膜抗体和抗腹膜LAG-3治疗抗体的批量生产。结果，我们成功地产生了14 mg的抗PD-1抗体。此外，目前促进了抗LAG-3抗体的质量产生。接下来，评估了抗PD-1治疗抗体的功能。首先，事实证明，基于基础，治疗抗体与PD-1的结合亲和力等于抗PD-1大鼠抗体。治疗抗体还显示了抑制PD-1和配体PD-L1结合的块抗体的功能。此外，使用BLV感染的牛肉进行了抗孕性PD-1治疗抗体的临床试验。对感染的母牛施用抗PD-1治疗抗体，并观察到随后的进展。施用抗体后，测试牛肉没有识别出特殊的临床症状。有人提出，从血清中检测到施用的抗体，直到给药后至少28次，并具有长期的半衰期。抗PD-1抗体的给药激活了BLV特异性CD4+ T细胞反应，并识别出抗病毒作用。因此，据建议，抗Curchin PD-1治疗抗体可能有效地延迟了BLV感染的发展。此外，除了今年外，为了扩大这种控制方法的应用范围，分析了牛在牛的纳普拉氏菌病中免疫识别受体的分析和功能，而PD-1则用于耗尽Anaprasma疾病中T细胞的耗尽。这表明lag-3的表达的兴起涉及参与。