Analysis of lipid regulation of neurotransmitter receptors using photo-sensitive amino acid

利用光敏氨基酸分析神经递质受体的脂质调节

基本信息

批准号：
22KF0249
负责人：
岡村康司
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KF0249/
关键词：
非天然アミノ酸イオンチャネル受容体

项目摘要

HCKを用いてイオンチャネルにおけるPIP2の結合を光で操作できるかどうかを確認するため、PIP2結合にlysineが関わることが従来良く知られており、機能発現が安定しているマウス由来内向き整流性K+チャネルKir2.1分子を用いて解析した。マウスKir2.1のK188にはPIP2が結合することが知られており、クラゲ由来のKir2.1オルソログではこの部位がアスバラギンになっているためPIP2親和性が低く、チャネル活性が弱いことが知られている。マウスKir2.1のK188にアンバーサプレッサーコドン（TAGコドン）を導入し、Deiters博士らが確立したtRNA(UAG-HCK)およびアミノアシルtRNA合成酵素をコードするプラスミドをアフリカツメガエル卵母細胞の核に顕微注入し、翌日Kir2.1 (K188TAG)のmRNAとHCKを細胞質に顕微注入して、１日後または２日後に、2本微小電極による膜電位固定法による、内向き整流性K+電流の電気生理学的計測を行なった。405 nmのUV光を照射し、計時的に内向きK+電流量の計測を行い、uncagingによるPIP2結合の回復過程を解析した結果、UV照射による電流量の有意な増加が確認された。この電流増加の程度は、細胞毎にばらつくことと、UV照射量に依存して生じることも明らかになった。

为了确认是否可以使用HCK通过光来操纵PIP2在离子通道中的结合，我们研究了源自小鼠的内向整流器，该内向整流器众所周知参与PIP2结合并且具有稳定的功能表达，并使用该分析进行了分析。 K+通道Kir2.1分子。已知PIP2与小鼠Kir2.1的K188结合，而在水母来源的Kir2.1直向同源物中，该位点是天冬酰胺，因此已知PIP2亲和力低且通道活性弱。将琥珀抑制密码子（TAG密码子）引入小鼠Kir2.1的K188中，并将由Deiters博士建立的编码tRNA（UAG-HCK）和氨酰-tRNA合成酶的质粒显微注射到非洲爪蟾卵母细胞的细胞核中。天Kir2.1 (K188TAG) mRNA和HCK被显微注射到细胞质中，1或2天后，使用两个微电极的膜电压钳法进行内向整流K+电流的电生理学测量。我们用 405 nm 紫外光照射，测量了随时间变化的内向 K+ 电流量，并分析了由于解笼锁而导致的 PIP2 结合的恢复过程。结果，我们确认了由于紫外线而导致的电流量显着增加。辐照。研究还表明，电流增加的程度因细胞而异，并且取决于紫外线照射量。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Inhibitory modulation of voltage- and pH-gated Slo3 potassium channel by zinc

锌对电压和 pH 门控 Slo3 钾通道的抑制调节

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Rizki Tsari Andriani;Yasushi Okamura;Takafumi Kawai
通讯作者：
Takafumi Kawai

Insight into the function of a unique voltage-sensor protein (TMEM266) and its short form in mouse cerebellum

深入了解小鼠小脑中独特电压传感器蛋白 (TMEM266) 的功能及其短形式

DOI：
10.1042/bcj20220033
发表时间：
2022
期刊：
Biochemical Journal
影响因子：
4.1
作者：
Kawai T;Narita H;Konno K;Akter S;Andriani RT;Iwasaki H;Nishikawa S;Yokoi N;Fukata Y;Fukata M;Wiriyasermkul P;Kongpracha P;Nagamori S;Takao K;Miyakawa T;Abe M;Sakimura K;Watanabe M;Nakagawa A;Okamura Y
通讯作者：
Okamura Y

Role of K364 next to the active site cysteine in voltage-dependent phosphatase activity of Ci-VSP

DOI：
10.1016/j.bpj.2023.01.022
发表时间：
2023-06-06
期刊：
BIOPHYSICAL JOURNAL
影响因子：
3.4
作者：
Paixao，Ian Costa;Mizutani，Natsuki;Okamura，Yasushi
通讯作者：
Okamura，Yasushi

DOI：
{{ item.doi }}
发表时间：
{{ item.publish_year }}
期刊：
{{ item.journal_name }}
影响因子：
{{ item.factor }}
作者：
{{ item.authors }}
通讯作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

岡村康司其他文献

Chondroitin sulfate characterized by the E disaccharide unit is a potent inhibitor of herpes simplex virus infectivity and provides binding sites for the virus binding to gro2C cells

以 E 双糖单元为特征的硫酸软骨素是单纯疱疹病毒感染性的有效抑制剂，并为病毒与 gro2C 细胞的结合提供结合位点

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
J.Biol.Chem. 280(37)
影响因子：
0
作者：
Okamaoto H.;T.Nishizawa;K.Sato;S.Otake;M.Sensu;T.Takemura;N.Sugimoto;I.Matsui;A.Shimizu;H.Kumagai;Y.Ohno;T.Takano;T.Nakajima;西澤智明;杉本伸夫;村田喜理;岡村康司;Y.Murata;Bergefall Kicki
通讯作者：
Bergefall Kicki