軸素輸送と成長円錐運動におけるコラプシン応答

轴突运输和生长锥运动中的塌陷反应

• 批准号: 08680844
• 负责人: 五嶋 良郎
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680844/
• 关键词: コラプシン; 軸索輸送; CRMP; 軸素ガイダンス; G蛋白質; 細胞内小胞輸送; 反発分子; セマフォリン

ファスチクリンIVホモログ、コラプシンは神経成長円錐の強い退縮活性を持つ分子量100kDの分泌型蛋白である。コラプシンによる退縮機構の詳細は現在ほとんど不明であるが、同応答はpertussis toxin (PTX)感受性を示す。この性質を利用し、アフリカツメガエル卵母細胞系を用いた発現クローニングによりコラプシン応答に関与する細胞内分子、CRMP-62(collpsin response mediator protein)を同定した。同分子はUNC-33と相同性を示す。UNC-33線虫変異株における表現型は、神経軸索における微小管の異常蓄積と、神経走行の広範な異常である。本研究の目的は、微小管を基本要素とする神経軸索輸送に着目し、コラプシンの軸索輸送に及ぼす効果を成長円錐に対する効果と比較・検討することにある。培養マウス後根神経節の軸索および成長円錐をビデオ増感微分干渉顕微鏡を用い観察した。コラプシン持続適用は濃度依存性に単位時間当たりの順行性、逆向性双方の輸送粒子数を増大した。増大のピーク値はコラプシン投与後、5-8分に認められ、それ以後漸次減少し適用30分後には基礎レベルに戻った。一方粒子の速度には有意な効果を示さなかった。PTX2時間前処理はコラプシン適用34分の時点における成長円錐退縮を完全に阻害したが、輸送粒子数の増大効果に対し無影響であった。Gタンパク質の活性化ペプチドであるマストパランは成長円錐を強力に退縮させるとともに、軸索輸送を抑制した。コラプシンと異なり、マストパランの両作用はいずれもPTXにより阻害された。以上の知見はコラプシンがPTX非感受性の、成長円錐の退縮応答とは異なった経路を介し、特異的に軸索輸送を促進することを示す。これと平行しCRMP分子の発現を特異的に抑制するアンチセンスオリゴヌクレオチドの検索を現在続行しつつある.

Fastiklin IV同源物Chorapsin是一种分泌型蛋白，分子量为100 kd，神经生长锥。 Corapsin的增强机制的细节目前几乎是未知的，但是响应表明百日咳毒素（PTX）敏感性。使用此特性，鉴定了通过使用非洲青蛙表达克隆来表达克隆的CRMP-62（Collpsin响应介质蛋白），这是一种细胞内分子。相同的下属表示与UNC-33同源。 UNC-33-Wire昆虫DECIANS中的表达类型是神经轴和神经驱动中微观管的多种异常积累。这项研究的目的是专注于基于微管管的神经基因搜索运输，并比较和检查胆碱蛋白轴转运的影响与对生长锥体的影响。使用视频引入的干扰显微镜观察培养小鼠的轴和根神节点和生长锥体的轴。 Colapsin继续应用增加了每单位时间和倒置或倒置的两个单位的运输颗粒数量。在施用Corapsin后的5-8分钟内，增加了增加的峰值，并逐渐降低，并在施用后30分钟恢复至基本水平。另一方面，颗粒的速度没有显着影响。 PTX2-小时预处理完全阻碍了适用于Corapsin的34分钟的生长锥弹弹性，但对运输颗粒的增加没有影响。桅杆 - paran是G蛋白的肽，它强烈控制了生长锥体并抑制了轴的运输。与Corapsin不同，PTX都阻碍了两种桅杆 - paran的使用。上面的发现表明，Corapsin将通过与PTX非敏感性的不同途径特异性促进轴向运输，这是一种生长的锥形再生反应。与此相关的是，搜索特异性抑制CRMP分子表达的抗大体寡核苷酸目前正在继续。

项目成果

Y.Goshima et al.: "Collapsin-induced growth cone collapse mediated by an intracellular protein related to UNC-33" Nature. 376・10. 509-514 (1995)

Y. Goshima 等：“由与 UNC-33 相关的细胞内蛋白介导的塌陷蛋白诱导的生长锥塌陷”Nature 376·10（1995）。

Y.Goshima et al.: "Facilitatory effects of collapsin on anoplasmic transport in mouse DRG neurons" Neurosci.Res.Suppl.20. 82p- (1996)

Y.Goshima 等人：“collapsin 对小鼠 DRG 神经元中异质运输的促进作用”Neurosci.Res.Suppl.20。