性フェロモン構成成分およびDNA塩基配列比較によるキンウワバ亜科の系統解析

通过比较性信息素成分和 DNA 碱基序列对 Corinthinae 亚科进行系统发育分析

基本信息

批准号：
08760041
负责人：
野村昌史
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

フェロモン成分の同定により、形態的には極めて近縁とされるキクキンウワバとネッタイキクキンウワバについては主成分が異なるという強い生殖隔離が明らかとなった。また野外でのフェロモントラップによる誘引試験を北海道、関東、沖縄で行ったところ、混生している沖縄地方においても両種が同じ成分に誘引されることはなく、強い生殖隔離が確認された。更にアロザイムやミトコンドリアDNAの制限酵素断片長多型といった生化学的手法を用いて両種の類縁関係を検討したこところ、やはり遺伝的に大きく異なるという結果が得られた。チトクロームオキシダーゼ領域の塩基配列比較については、PCR産物のダイレクトシークエンスを行い、大腸菌を用いてのクローニングは行わずに研究を進めた。より簡便な手法により個体数・種類数を増やすためであり、個体数を多くすることによって塩基配列の確認を行った。PCR産物にイソプロパノールと酢酸アンモニウムを併用した処理を行い、シークエンスを行ったところ、300〜500塩基の配列を明らかにすることができた。これまでに明らかとなっているショウジョウバエなどの領域と比較したところ、確かに目的の領域の一部の配列を示していることが確認された。試薬などの関係でこれ以上の配列を確認することができなかったが、種間の比較については変異が蓄積している領域であったため、解析を行うことができた。キンウワバ類5種の配列を比較検討したところ、キクキンウワバとネッタイキクキンウワバが配列が異なる傾向が見られ、これまでの生化学的手法の結果および本研究によるフェロモン成分の結果を支持した。以上得られた成果について学会の大会で報告を行う予定である。今後は更に多くの種のフェロモン成分を明らかにするとともに、DNA塩基配列情報を蓄積し、亜科内の種の分子系統学的研究を行っていく予定である。

信息素成分的鉴定揭示了强烈的生殖分离，其中菊花和菊花的主要成分被认为是非常亲密的亲戚，在形态学上有所不同。此外，当在北海道，关东和冲绳的户外诱导信息素陷阱时，这两种物种都没有被混合的冲绳区域的相同成分吸引，并确认了强大的生殖分离。此外，当我们使用生化技术（例如同酶和限制酶片段长度多态性）在线粒体DNA中研究两种物种之间的关系时，我们发现它们在遗传上有显着差异。关于比较细胞色素氧化酶区域的核苷酸序列，直接对PCR产物进行了测序，并在不使用大肠杆菌克隆的情况下进行了研究。这是为了使用更简单的方法增加个人和物种的数量，并通过增加个体数量来确认基本序列。将PCR产物用异丙醇和乙酸铵进行处理，并进行序列，并揭示了300-500碱基的序列。与迄今为止显而易见的果蝇等区域相比，可以证实它们肯定显示了所需地区的一部分。尽管由于试剂等，无法确认进一步的序列，但由于突变积累，因此可以进行分析以进行比较。在比较五种猴子鲸鱼的序列时，根据这项研究，猴子鲸鱼和猴子鲸的序列趋于支持先前的生化方法的结果和信息素成分的结果。我们计划报告上面在会议上获得的结果。将来，我们计划阐明更多物种的信息素成分，积累DNA碱基序列信息，并对亚科中物种进行分子系统发育研究。