ヒト唾液腺癌細胞におけるEpstein-Barrウイルス持続感染
人类唾液腺癌细胞中持续的 Epstein-Barr 病毒感染
基本信息
- 批准号:09877390
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:1997
- 资助国家:日本
- 起止时间:1997 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1.ヒト唾液腺癌細胞(HSG)よりtotalRNAを抽出し、Molonyマウス白血病ウイルスの逆転写酵素とランダム・プライマーを用いてcDNAを調製し、これからC3d/EBVレセプターcDNAを増幅した。すなわち、cDNA-polymerase chain reaction(PCR)により、C3d/EBVレセプターに特異的なcDNAを、プライマーとして5'-CAATGGTAGTCGCGTGATTAGGTG-3'(C3d/EBVレセプター遺伝子配列No.2535-2558)と5'-TTCCAAGCAATGAGGCACACACCA-3'(C3d/EBVレセプター遺伝子配列No.3208-3185)を用いて増幅し、更にSouthern blot analysisにより、C3d/EBVレセプターアンチセンスオリゴヌクレオチド5'-GCACACCTGGCACCCATGTGTTATCAGTAT-3'に^<32>P-標識したものをプローブとして用いてC3d/EBVレセプターcDNAを同定した。2.C3d/EBVレセプター抗原(CR-2)に対するマウス単クローン抗体を用いて、HSG細胞におけるCR-2の発現を蛍光抗体法及びimmunoblottingにより検索した結果、細胞質にCR-2の発現を検出した。一方、HSG細胞をdibutyryl cAMPで処理すると、CR-2は細胞膜にtranslocationすることを明らかにした。3.EBV産生B95-8細胞をTPAで処理して調製したEBVを、dibutyrylcAMPで処理したHSG細胞に感染させた。この感染細胞において、EBNAとVCAとの発現を蛍光抗体法により検出した。この場合、EBVのカプシド蛋白質gp220(BamH1L領域)とEBNA1(BamH1K領域)のEBVゲノムの存在をPCRにより検出した。
1。从人类唾液腺癌细胞(HSG)中提取总RNA,并使用molony鼠白血病病毒和随机引物的逆转录酶制备cDNA,并从中扩增C3D/EBV受体cDNA。 That is, cDNA specific for the C3d/EBV receptor is amplified by cDNA-polymerase chain reaction (PCR) using 5'-CAATGGTAGTCGCGTGATTAGGTG-3' (C3d/EBV receptor gene sequence No. 2535-2558) and 5'-TTCCAAGCAATGAGGCACACACCA-3' (C3d/EBV receptor gene sequence No. 3208-3185) as primers, and furthermore, Southern blot By analysis, C3d/EBV receptor cDNA was identified using ^<32>P-labeled C3d/EBV receptor antisense oligonucleotide 5'-GCACACCTGGCACCCATGTGTTATCAGTAT-3' as a probe. 2。使用针对C3D/EBV受体抗原(CR-2)的小鼠单克隆抗体,通过免疫印迹和免疫印迹来检测细胞质中的CR-2表达来搜索HSG细胞中CR-2的表达。另一方面,据揭示了当HSG细胞用二丁酰基cAMP处理时,CR-2会易位到细胞膜中。 3。通过用Dibutyrylcamp处理的HSG细胞感染了通过TPA处理EBV产生的B95-8细胞制备的EBV。通过感染细胞中的免疫荧光检测到EBNA和VCA的表达。在这种情况下,PCR检测到Capsid蛋白GP220(BAMH1L区域)和EBNA1(BAMH1K区)的EBV基因组的存在。
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Mitsunobu Sato: "Induction of cyclin-dependent kinase inhibitor,p21WAF1 by treatment with 3,4-dihydro-6-[4-(3,4)-dimethoxybenzoyl)-1-piperaginy 2(1H)-quinolinone(vesnarinone)in a human salivary cancer cell line with mufant" Cancer Letters. 112(4). 181-189
Mitsunobu Sato:“通过 3,4-二氢-6-[4-(3,4)-二甲氧基苯甲酰基)-1-哌嗪基 2(1H)-喹啉酮(vesnarinone)处理来诱导细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p21WAF1
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Masayuki Azuma: "Enhancement of bFGF export associated with malignant progression of human salivary gland cell clones" Int.f.Cancer. 71(2). 891-896 (1997)
Masayuki Azuma:“bFGF 输出的增强与人类唾液腺细胞克隆的恶性进展相关”Int.f.Cancer。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Mitsunobu Sato: "Epstein-Barr virus(EBV)infection of neoplastic human salivary intercalated duct cell line HSG expressing C3d/EBV receptor" Proceedings of 88th Annual Meeting of American Association for Cancer Research. 38. 159- (1997)
Mitsunobu Sato:“表达 C3d/EBV 受体的肿瘤性人唾液闰管细胞系 HSG 的 Epstein-Barr 病毒 (EBV) 感染”美国癌症研究协会第 88 届年会论文集。
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- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Mitsunobu Sato: "Emergence of osteoblast-like cells in a neoplastic human salivary cancer cell line after treatment with 22-oxa-1α,25-dihydroxyvitamin D_3" Cancer Letters. 115(4). 149-160 (1997)
Mitsunobu Sato:“用 22-oxa-1α,25-二羟基维生素 D_3 治疗后,肿瘤性人唾液癌细胞系中成骨细胞样细胞的出现”,Cancer Letters 115(4) 149-160。
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佐藤 光信
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