アポトーシス誘導分子の制御による特異的免疫抑制療法の開発

通过调节凋亡诱导分子开发特异性免疫抑制疗法

基本信息

批准号：
08877195
负责人：
中嶋啓雄
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至 1997
项目状态：
已结题

项目摘要

特異的免疫抑制療法の開発を目的として、lCEおよびApopainに対する最も抑制活性の高い低分子のCaspases inhibitorをラットの心移植の系に投与し、生着延長効果、アポトーシス抑制効果を判定基準に最適の投与量、投与法、投与時期の検討を行った。なお、平成8年度の研究結果より、ICEに対してはVAD-FK,Apopainに対してはZ-DEVD-FMKが最適のinhibitorであることが証明できたので、これらの単独投与を施行した。A)BN(RT-1n)をドナー、Lewis(LEW,RT-1])をレシピエントとする系で異所性心移植を行い、レシピエントに移植当日より連続7日間、経静脈的に1mM/dayでそれぞれを投与し、生着延長効果と組織におけるアポトーシス抑制効果を解析した。A-1)生着延長効果:control群の6.9日に対して、VAD-FK群では8.9日(n=5)、Z-DEVD-FMK群では11.8日(n=7)と生着延長が認められたが、Z-DEVD-FMK群においてのみ有意差が得られた。B)TUNNEL法を用いたアポトーシス染色(移植後5日目)では、control群に比べて実験群では陽性細胞数は減少しており、特にZ-DEVD-FMK群において著明に減少していた。(以上の結果に対して論文準備中)(結論)Caspase inhibitorによって生着延長が得られたことより、アポトーシスが拒絶反応の促進に重要な役割を果たしていることが判明した。また、本研究の成果を基に今後、少量のCSA,FK506を本剤に併用することで、臓器毒性の少ない特異的免疫抑制療法が確立できると考えられた。

为了开发特异性免疫抑制疗法，我们将对 lCE 和 Apopain 具有最高抑制活性的低分子量 caspase 抑制剂给予大鼠心脏移植系统，并确定其对延长存活和抑制细胞凋亡的最佳效果。给药剂量、方法和时间。 1996年的研究结果表明，VAD-FK是ICE的最佳抑制剂，Z-DEVD-FMK是Apopain的最佳抑制剂，因此单独给药。 A)以BN(RT-1n)为供体，Lewis(LEW，RT-1])为受者进行异位心脏移植，从移植之日起连续7天给受者静脉注射1mM各药物。每天给药，分析组织中的生存延长作用和凋亡抑制作用。 A-1) 延长植入的效果：对照组为 6.9 天，VAD-FK 组为 8.9 天（n=5），Z-DEVD-FMK 组为 11.8 天（n=7）。仅在 Z-DEVD-FMK 组中获得显着差异。 B)采用TUNNEL法进行细胞凋亡染色(移植后5天)显示，与对照组相比，实验组阳性细胞数量减少，且Z-DEVD-FMK组减少尤为明显。 (根据上述结果准备论文) (结论) caspase抑制剂的植入时间延长表明细胞凋亡在促进排斥反应中发挥着重要作用。此外，根据本研究的结果，认为通过将少量CSA和FK506与该药物组合，可以建立器官毒性较小的特异性免疫抑制疗法。