タウのリン酸化抑制による神経保護の可能性-視神経傷害での検討

通过抑制 tau 磷酸化来保护神经的可能性 - 视神经损伤中的考虑

• 批准号: 22K09845
• 负责人: 奥 英弘
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09845/
• 关键词: tau; LiCl; GSK3β; タウオパチー; 視神経傷害; 網膜神経節細胞; タウ蛋白; CDK5

視神経傷害により生じる逆行性軸索変性と網膜神経節細胞死に、tauopathyが関与していることを明らかにした。tauopathyはtauの異常なリン酸化により、tau oligomerが形成され生じると考えられている。視神経傷害により惹起されるtauのリン酸化に、GSK3βが関与している可能性につき検討した。視神経傷害後に生じるGSK3β発現変化を免疫組織科学的に検討した。網膜神経節細胞をTuj1で標識し、網膜神経節細胞レベルでのGSK3βの発現を共焦点レーザー顕微鏡で観察した。その結果、網膜神経節細胞は経時的に減少するが、GSK3βの発現は亢進するのが観察された。特にTuj-1の染色性が低下し網膜神経節細胞が変性過程にある細胞で、GSK3βの発現が亢進しており、GSK3βが網膜神経節細胞死に関与していると考えられた。次いでday 7にGSK3βとtauの発現を二重染色で検討したところ、GSK3βとtauは共発現していることが確認された。GSK3β阻害剤であるLiClを硝子体中に投与し、day 3で網膜を摘出し、immunoblotでタウタンパクの発現変化を検討した。リン酸化タウの発現は、視神経傷害でcontrolの2.4倍に有意に増加したが、LiCl投与群ではcontrolの1.4倍にとどまり、GSK3βは視神経傷害後に生じるタウタンパクのリン酸化に関与していると考えられた。視神経傷害後day7に網膜伸展標本を作製し、Tuj-1染色で網膜神経節細胞を標識し、LiClによる神経保護作用を検討した。網膜神経節細胞密度は、LiCl投与群で有意に温存され、LiClにより神経保護作用が確認された。これらの結果から、視神経傷害後の網膜神経節細胞死をもたらすtauopathyに、GSK3βが関与していることが示唆された。

我们发现，tauopathy参与了逆行轴突变性和视网膜神经节细胞死亡由视神经损伤引起的。陶氏病被认为是由于tau异常磷酸化引起的tau低聚物引起的。我们研究了GSK3β可能与视神经损伤引起的TAU磷酸化的可能性。在免疫组织化学中检查了视神经损伤后GSK3β表达的变化。通过共聚焦激光显微镜观察到视网膜神经节细胞用Tuj1标记为视网膜神经节细胞水平上GSK3β的表达。结果，观察到视网膜神经节细胞会随着时间的流逝而降低，但GSK3β表达增加。特别是，Tuj-1的染色能力会降低，视网膜神经节细胞处于退化过程中，GSK3β增加了，GSK3β被认为与视网膜神经节细胞死亡有关。接下来，在第7天，通过双重染色检查了GSK3β和TAU的表达，并证实GSK3β和Tau被共表达。 LICL是GSK3β抑制剂，在玻璃体中施用，并在第3天去除视网膜，并使用免疫印迹检查了Tau蛋白表达的变化。在视神经损伤中，磷酸化tau的表达显着增加了2.4倍，但在LICL组中仅控制了1.4倍，而GSK3β被认为参与了视神经损伤后发生的TAU蛋白的磷酸化。视神经损伤后，制备视网膜延伸试样，并用Tuj-1染色标记视网膜神经节细胞，并研究了LICL的神经保护作用。在LICL组中，视网膜神经节细胞密度显着保存，并由LICL确认神经保护作用。这些结果表明GSK3β参与了陶氏病，这导致视神经损伤后视网膜神经节细胞死亡。

项目成果

視神経病態時のastrocyteの変化

视神经病理过程中星形胶质细胞的变化

• 发表时间: 2022
• 作者: 柊山 友里恵;廣川 貴久;奥 英弘;喜田 照代.;奥 英弘
• 通讯作者: 奥 英弘

Tau蛋白リン酸化抑制による神経保護作用の検討

抑制 Tau 蛋白磷酸化的神经保护作用的检查

• 发表时间: 2020
• 作者: 廣川 貴久 ;奥 英弘 ;堀江 妙子 ;喜田 照代 ;池田 恒彦
• 通讯作者: 池田 恒彦