肝臓癌PDXモデルのリン酸化プロテオーム解析による革新的分子治療標的薬の同定

通过肝癌PDX模型的磷酸化蛋白质组分析鉴定创新分子治疗靶点

基本信息

批准号：
22K08844
负责人：
森治樹
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Shiga University of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

肝細胞癌は再発率が高い予後不良な固形癌である。近年のゲノム解析技術の目覚ましい発展にもかかわらず、切除不能進行・再発肝細胞癌に対する分子標的治療の貢献は限定的で、革新的なアプローチによる新規治療法の開発が急務である。そこで、本研究では、外科手術検体から肝臓癌患者腫瘍組織移植（patient-derived xenograft; PDX）モデルを作成し、チロシンリン酸化に重点を置いた高感度リン酸化プロテオーム解析によって、肝臓癌特異的なリン酸化タンパク質や活性化シグナル経路を同定する。さらに、得られたキナーゼ活性分子プロファイルから、新規治療標的分子や薬剤感受性予測バイオマーカーの探索を行い、そして最終的にはそれらをターゲットとする革新的な治療法の開発から肝臓癌の克服を目指す。本年度は、肝臓癌6症例についてPDXモデルを作成し、このうち1症例においては、さらに患者腫瘍由来細胞株（Patient-derived cells; PDC）を樹立できた。現在各PDX腫瘍のエクソーム解析、トランスクリプトーム解析を行っており、またリン酸化プロテオーム解析の準備を進めている。また、並行して、高脂肪食負荷MC４R欠損マウスに発生した肝臓癌から肝臓癌細胞株2株を樹立した。マウス肝臓癌細胞株については、低濃度ソラフェニブの存在下に長期培養することでソラフェニブ耐性株の作成に成功し、現在高感度リン酸化プロテオーム解析を行っている。

肝细胞癌是一种复发率高、预后差的实体癌。尽管近年来基因组分析技术取得了显着发展，但分子靶向治疗对不可切除的晚期/复发性肝细胞癌的贡献有限，迫切需要利用创新方法开发新的治疗方法。因此，在本研究中，我们利用手术标本创建了患者来源的异种移植物 (PDX) 模型，并进行了高度灵敏的磷酸化蛋白质组分析，重点关注酪氨酸磷酸化和激活信号通路。此外，从获得的激酶活性分子谱中，我们将寻找新的治疗靶分子和药物敏感性预测生物标志物，并最终通过开发针对它们的创新疗法来克服肝癌。今年，我们为 6 例肝癌创建了 PDX 模型，其中一个病例我们能够进一步建立患者来源的细胞系 (PDC)。我们目前正在对每个 PDX 肿瘤进行外显子组和转录组分析，并正在准备磷酸化蛋白质组分析。同时，从食用高脂肪饮食的 MC4R 缺陷小鼠体内产生的肝癌中建立了两种肝癌细胞系。关于小鼠肝癌细胞系，我们通过在低浓度索拉非尼存在下长时间培养，成功地创建了索拉非尼耐药细胞系，目前正在进行高灵敏度磷酸化蛋白质组分析。