Phf6およびPhipによる骨髄ニッチを介した造血幹細胞制御機構の解明

阐明骨髓微环境中 Phf6 和 Phip 介导的造血干细胞控制机制

基本信息

批准号：
22K08477
负责人：
加藤裕子
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Shimane University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本研究ではPhf6およびPhipの骨髄微小環境、特に代表的な造血支持能細胞であるレプチンレセプター陽性間葉系幹細胞LepR+MSCにおける役割を明らかにするため、LepR+MSC特異的Phf6欠損マウス(LepR-Cre;Phf6f/y)およびLepR+MSC特異的Phip欠損マウス(LepR-Cre;Phipf/f)を作製した。またバックアップとして、骨髄間質細胞で広範にCre recombinase を発現するPrx1-Creを用いたコンディショナルノックアウトマウスPrx1-Cre;Phf6f/yおよびPrx1-Cre;Phipf/fマウスも作製した。LepR-Cre;Phipf/fおよびPrx1-Cre;Phipf/fマウスは正常に生まれ、生後１２ヶ月までの体重変化にコントロールと比較して異常は認められなかった。生後２ヶ月より生後１２ヶ月まで経時的に末梢血液細胞数の計測を行なった結果、白血球、赤血球、ヘマトクリット、血小板について、コントロールマウスとコンディショナルノックアウトマウス間に有意差はなかった。次に、６ヶ月齢および１０カ月齢のマウスについて解析を行った。骨髄切片のH E染色では、骨梁や脂肪量に大きな差異は認められなかった。また、骨髄中の造血幹細胞数に有意差は認められなかった。造血幹細胞ニッチを構成するLepR+MSC（LepR+Sca1-CD31-）細胞の割合および絶対数に有意差は認められなかったが、Sca1+CD31+血管内皮細胞の割合および絶対数が有意に減少していることが示された。

在本研究中，我们旨在阐明Phf6和Phip在骨髓微环境中的作用，特别是在瘦素受体阳性间充质干细胞LepR+MSC（典型的造血支持细胞Cre）和LepR+MSC中的作用。 -产生特异性Phip缺陷小鼠(LepR-Cre；Phipf/f)。作为备份，还使用 Prx1-Cre 生成了条件敲除小鼠 Prx1-Cre;Phf6f/y 和 Prx1-Cre;Phipf/f 小鼠，Prx1-Cre 在骨髓基质细胞中广泛表达 Cre 重组酶。 LepR-Cre;Phipf/f 和 Prx1-Cre;Phipf/f 小鼠出生正常，与对照组相比，出生后 12 个月内未观察到体重变化异常。测量出生后2个月至出生后12个月期间外周血细胞数量的结果显示，对照小鼠与条件敲除小鼠之间的白细胞、红细胞、血细胞比容和血细胞比容没有显着差异。血小板。接下来，对 6 个月大和 10 个月大的小鼠进行了分析。骨髓切片的HE染色显示骨小梁或脂肪含量没有显着差异。此外，骨髓中造血干细胞的数量没有观察到显着差异。构成造血干细胞微环境的LepR+MSC(LepR+Sca1-CD31-)细胞的比例和绝对数量没有观察到显着差异，但Sca1+CD31+血管内皮细胞的比例和绝对数量显着减少。表明存在。