非乳頭部十二指腸腺癌の2つの発癌経路の検証と分子機構の解明

非壶腹十二指肠腺癌两条致癌途径的验证及分子机制的阐明

• 批准号: 22K08014
• 负责人: 澤田 武
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08014/
• 关键词: 十二指腸腫瘍; 十二指腸腺腫; 十二指腸腺癌; 遺伝子変異; DNAミスマッチ修復遺伝子; 十二指腸癌; 小腸癌; 非乳頭部十二指腸腺癌; 小腸腺癌

本研究の目的は、非乳頭部十二指腸腺腫・粘膜内癌・進行癌における分子病理学的異常を同定し、形質発現による分類と比較することにより、2つの発癌経路を検証することである。胃型・小腸型のそれぞれの腫瘍において遺伝子異常の有無やその頻度を比較することにより、2つの経路における発癌の詳細な分子機構を明らかにする。具体的には、非乳頭部十二指腸腫瘍 53病変を対象とし、病理診断と粘液形質の免疫組織化学（MUC5AC, MUC6, CD10, MUC2, PG-I）による胃型と小腸型への分類を行う。各病変からDNA抽出を行い、75の癌関連遺伝子を探索するカスタムパネルを用いて、次世代シーケンスで変異・コピー数異常の解析を行う。胃型・小腸型のそれぞれの病変について遺伝子異常を確認し、その異同により2つの分子病理学的発癌経路の存在を確認する。また、胃型・小腸型それぞれの腺腫・粘膜内癌における遺伝子異常の頻度を比較することにより、多段階発癌の関与を検証する。合わせて、免疫組織化学でDNAミスマッチ修復蛋白（MLH1, MSH2, MSH6, PMS2）の評価を行う。得られたゲノム情報、病理組織学的所見、内視鏡所見をそれぞれ比較し、胃型・小腸型腫瘍それぞれについて、発癌可能性が高く、優先して治療すべき早期病変を予測する内視鏡診断体系を確立する。当該年度に病理診断と粘液形質の免疫組織化学による胃型・小腸型への分類は終了しており、53病変は小腸型腺腫 26病変、胃型腺腫 4病変、鋸歯状腺腫1病変、小腸型粘膜内癌 8病変、胃型粘膜内癌 1 病変、進行癌 13病変に分類された。また、DNAミスマッチ修復蛋白の免疫組織化学も終了した。さらにDNA抽出の後、遺伝子変異・コピー数異常の解析を行った。

本研究的目的是鉴定非乳头状十二指肠腺瘤、粘膜内癌和晚期癌症的分子病理学异常，并通过将它们与基于性状表达的分类进行比较来验证两种致癌途径。通过比较胃型和小肠型肿瘤中是否存在遗传异常及其频率，我们将阐明这两种途径致癌的详细分子机制。具体来说，我们将针对53例非乳头状十二指肠肿瘤，根据病理诊断和粘液免疫组化（MUC5AC、MUC6、CD10、MUC2、PG-I）将其分为胃型和小肠型。将从每个病变中提取 DNA，并使用下一代测序技术，使用搜索 75 个癌症相关基因的定制面板来分析突变和拷贝数异常。我们将确认胃型和小肠型病变的基因异常，并根据其差异确认两种分子病理致癌途径的存在。此外，通过比较胃型和小肠型腺瘤和粘膜内癌的遗传异常频率，我们将验证多阶段癌发生的参与。同时，DNA错配修复蛋白（MLH1、MSH2、MSH6、PMS2）将通过免疫组织化学进行评估。内窥镜检查将获得的基因组信息、组织病理学结果和内镜检查结果进行比较，以预测具有高致癌潜力并应优先治疗胃型和小肠型肿瘤的早期病变。今年完成了基于病理诊断和粘液特征免疫组化的胃型和小肠型分类，53个病灶分为小肠型腺瘤（26个病灶）、胃型腺瘤（4个病灶）、锯齿状腺瘤（病灶分为粘膜内癌8个病灶、胃型粘膜内癌1个病灶、晚期癌13个病灶。 DNA 错配修复蛋白的免疫组织化学也已完成。此外，提取DNA后，还分析了基因突变和拷贝数异常。