神経-グリア間相互作用の調節を通じた、社会行動の制御メカニズム

通过调节神经元-胶质细胞相互作用控制社会行为的机制

基本信息

批准号：
22K06493
负责人：
島田忠之
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

アストロサイト特異的Tsc1ノックアウトマウスを利用し、NF-kB活性が社会行動に影響を与えているかを解析した。ノックアウトマウスではアストロサイト特異的にNF-kBのリン酸化が亢進していることをすでに見出していたため、NF-kBの活性阻害剤をノックアウトマウスに投与し、社会行動の異常が改善するかを解析した。阻害剤投与マウスでは社会行動の異常が回復していることが観察された。さらに、組織学的解析により、アストロサイトにおけるNF-kBのリン酸化も低下していることが確認された。また、NF-kBの下流において発現が調節される因子を同定するため、培養グリア細胞を用いたスクリーニングを行った。Tsc1ノックアウトアストロサイト、Tsc1; synteninダブルノックアウトアストロサイト、コントロールアストロサイト、また、Tsc1ノックアウトアストロサイトの培地にRheb活性阻害剤、あるいはNF-kB活性阻害剤を添加したものを作製した。それらのアストロサイトから、それぞれmRNAを回収し、マイクロアレイ解析、および定量PCR解析を行った。得られた定量結果から、Tsc1ノックアウトにより発現が上昇し、Synteninノックアウト、およびRhebあるいはNF-kB活性阻害により発現上昇が抑えられる遺伝子群の同定を試みた。得られた候補遺伝子群の中で、細胞外に分泌されると考えられるものを中心に定量解析を行い、Tsc/Rheb/Syntenin/NF-kBシグナルに依存して発現が調節されていると考えられる因子を同定することができた。

使用星形胶质细胞特异性 Tsc1 敲除小鼠，我们分析了 NF-kB 活性是否影响社会行为。由于我们已经发现基因敲除小鼠的星形胶质细胞中 NF-kB 磷酸化特异性增加，因此我们给基因敲除小鼠施用了 NF-kB 活性抑制剂，并分析了异常社会行为是否得到改善。据观察，用抑制剂治疗的小鼠的社会行为异常得到恢复。此外，组织学分析证实星形胶质细胞中NF-kB的磷酸化也减少了。此外，我们使用培养的神经胶质细胞进行了筛选，以确定其表达受 NF-kB 下游调节的因子。制备Tsc1敲除星形胶质细胞、Tsc1；联蛋白双敲除星形胶质细胞、对照星形胶质细胞和其中在培养基中添加了Rheb活性抑制剂或NF-kB活性抑制剂的Tsc1敲除星形胶质细胞。从每个星形胶质细胞收集 mRNA，并进行微阵列分析和定量 PCR 分析。从获得的定量结果中，我们试图鉴定出通过 Tsc1 敲除而表达增加的基因组，以及通过 Syntenin 敲除和 Rheb 或 NF-kB 活性抑制来抑制表达增加的基因组。在获得的候选基因中，我们对那些被认为是细胞外分泌的基因进行了定量分析，我们认为其表达是根据Tsc/Rheb/Syntenin/NF-kB信号进行调节的，我们能够识别出相关因素。为了这。