摂取した食品成分等が大腸上皮細胞の活性酸素産生系Nox1に及ぼす影響の総括的解析

综合分析摄入食物成分对结肠上皮细胞活性氧产生系统Nox1的影响

• 批准号: 22K02173
• 负责人: 菊池 秀彦
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Shokei Junior College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2027-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K02173/
• 关键词: 活性酸素; 大腸細胞; 白血球; フィトケミカル; 定量性ＰCＲ; 大腸上皮細胞; 腸管細胞; Nox1; 食品成分

本年度は、まず、ヒト大腸癌培養細胞のNox1及びその関連分子（NoxA1, NoxO1, p22-phox）の遺伝子について、それらの発現量（転写量）を定量性PCR法（qPCR）で定量するシステムの確立に取り組んだ。調査した細胞株のうち、JCRB細胞バンクより提供いただいたヒト大腸癌由来のDLD-1細胞はこれら全ての遺伝子を発現しており、今回の実験目的に合致することが分かった。次に、DLD-1細胞を種々の分化誘導剤（レチノイン酸、活性型ビタミンD3及びインターフェロンγ）で処理した後に、Nox1及びその関連分子（NoxA1, NoxO1, p22-phox）の遺伝子の発現量を定量した。その結果、レチノイン酸がNox1の転写量を約2倍に増強することが明らかとなった。これらの結果を受けて、細胞としてDLD-1、分化誘導剤としてレチノイン酸を用いてNox1及びその関連分子（NoxA1, NoxO1, p22-phox）の遺伝子発現の変化を評価するシステムの構築が完了した。次に、DLD-1細胞を種々のフィトケミカル＋レチノイン酸で処理した際のNox1及びその関連分子（NoxA1, NoxO1, p22-phox）の遺伝子発現量を調べたところ、特にスルフォラファンが顕著な抑制効果を示した。来年度以降は、対象となるフィトケミカルの種類を増やして、それらの効果を検証して行く予定である。一方、フィトケミカルが白血球の活性酸素産生系Nox2に及ぼす影響の解析については、緑茶の旨味成分として知られるL-テアニンがこれを強力に活性化することを見いだし、Microbiology and Immunology誌に発表した（Kikuchi H. et al., Microbiol. Immunol., 66: 342-349, 2022）。

今年，我们将首先开发一个系统，使用我致力于建立的定量PCR（qPCR）来量化培养的人类结肠癌细胞中Nox1和相关分子（NoxA1、NoxO1、p22-phox）基因的表达水平（转录水平）。它。在所研究的细胞系中，JCRB细胞库提供的人结肠癌衍生的DLD-1细胞表达所有这些基因，并且被发现适合本实验的目的。接下来，用各种分化诱导剂（视黄酸、活性维生素D3和干扰素γ）处理DLD-1细胞后，我们测量了Nox1及其相关分子（NoxA1、NoxO1、p22-phox）基因的表达水平。定量。结果表明，视黄酸使 Nox1 转录增强大约两倍。基于这些结果，我们使用DLD-1作为细胞，视黄酸作为分化诱导剂，完成了评估Nox1和相关分子（NoxA1、NoxO1、p22-phox）基因表达变化的系统的构建。接下来，我们研究了用各种植物化学物质+视黄酸处理DLD-1细胞时Nox1和相关分子（NoxA1、NoxO1、p22-phox）的基因表达水平，发现萝卜硫素具有特别明显的抑制作用。从明年开始，我们计划增加目标植物化学物质的数量并验证其效果。另一方面，在分析植物化学物质对白细胞的活性氧产生系统Nox2的影响时，我们发现绿茶的鲜味成分L-茶氨酸可以强烈激活Nox2，我们发表在微生物学和免疫学（Kikuchi H. 等人，Microbiol.Immunol., 66: 342-349, 2022）。

项目成果

Bifunctional activity of tangeretin (5,6,7,8,4'-pentamethoxyflavone) in suppression of cell growth and gene expression of the superoxide-generating system-related proteins in U937 cells

橘子素的双功能活性（5,6,7,8,4

• DOI: 10.2131/fts.9.151
• 发表时间: 2022
• 期刊: Fundamental Toxicological Sciences
• 作者: Hidehiko Kikuchi;Kaori Harata;Sumiko Akiyoshi;Takefumi Sagara;Harishkumar Madhyastha;Hitomi Mimuro;Futoshi Kuribayashi
• 通讯作者: Futoshi Kuribayashi

KIKUCHI LAB.

菊池实验室。

ウロリチンＡはgp91-phox遺伝子発現を増強することにより、U937細胞のレチノイン酸誘導性活性酸素産生能を亢進する

Urolithin A 通过增强 gp91-phox 基因表达来增强视黄酸诱导的 U937 细胞活性氧产生能力。

• 发表时间: 2022
• 作者: 菊池秀彦;原田香;栗林太
• 通讯作者: 栗林太

Pheophorbide-a acts as a photodynamic DNA-damaging reagent that causes remarkable increase in 8-hydroxydeoxyguanosine in cellular DNA

脱镁叶绿酸-a 充当光动力 DNA 损伤剂，导致细胞 DNA 中 8-羟基脱氧鸟苷显着增加

• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Association of Food Science Education in Japan
• 作者: Inuo Chisato;Okazaki Fumiko;Shiraki Rie;Tanaka Yutaka;Momma Keiko;Kondo Yasuto;Narita Hiroshi;Mori Satomi，Kurihara Kazuyuki，Inuo Chisato;廣田 恵璃，塚原 歩，藤田 真弓，津曲 俊太郎，高増 哲也，犬尾 千聡;犬尾 千聡;松本 由里香，塚原 歩，藤田 真弓，津曲 俊太郎，高増 哲也，犬尾 千聡;村上 純子，津曲 俊太郎，藤田 真弓，塚原 歩，高増 哲也，犬尾 千聡;塚原 歩，藤田 真弓，津曲 俊太郎，岡本 義久，高増 哲也，犬尾 千聡;塚原 歩，藤田 真弓，津曲 俊太郎，松本 由里香，高増 哲也，犬尾 千聡;藤田 真弓，松本 由里香，高増 哲也，犬尾 千聡;藤田 真弓，塚原 歩，津曲 俊太郎，松本 由里香，高増 哲也，犬尾 千聡;Hidehiko Kikuchi
• 通讯作者: Hidehiko Kikuchi