アミラーゼ分泌能を可視化・数値化可能な光る耳下腺培養細胞系の構築

构建可可视化和量化淀粉酶分泌能力的发光腮腺培养细胞系

基本信息

批准号：
22K10293
负责人：
関亦明子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Fukushima Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

がん治療において有害事象のひとつである唾液分泌障害は予防が第一であり、支持療法として唾液腺防護剤をがん治療時に同時に使用することが効果的である。唾液腺防護剤の開発には、唾液腺の機能を可視化・数値化できる唾液腺培養系と薬効の検証のために動物モデルが必須となる。そこで、我々はがん治療で特にその傷害が問題となる耳下腺とその機能を反映するアミラーゼ分泌に注目して、これまでに“蛍光耳下腺マウス”を作製した。本研究では、長期培養で唾液分泌能が低下するというこれまでの問題点を克服し、唾液腺の機能を可視化・数値化できる光る耳下腺培養系をこの蛍光耳下腺マウスから単離した耳下腺細胞を利用して構築することと、マウス個体を放射線障害の動物モデルとして確立することで、既知の抗酸化剤の唾液腺防護効果を判定することを目指している。本年度は、放射線障害モデルマウス作製のための条件検討を行った。検討した事項は、1）実験に使用するマウスの週齢と性別、2）照射するX線の強度、3）X線照射後の飼育日数、4）唾液腺組織傷害の程度、5）傷害を判定するために用いる指標について、であった。その結果、1）使用するマウスは８週齢のICRメスとした。2）放射線の強度は10 Gyから30 Gyまでとしたところ10 Gyでも唾液分泌低下や体重の低下がみられていた。3）X線照射後の飼育日数は30日までとした。30 Gyの照射でも30日後にマウスの生存が確認された。4）唾液腺組織傷害はこれまでに肉眼的には観察されていない。5）今後、組織の免疫染色によるアポトーシスやDNA損傷の程度の可視化、繊維化の程度を観察する予定である。

预防是唾液分泌障碍的主要原因，这是癌症治疗中不良事件之一，在癌症治疗期间同时使用唾液腺保护剂作为支持护理是有效的。为了开发唾液腺保护剂，动物模型对于验证可以可视化和量化唾液腺功能及其有效性的功能的唾液腺培养系统至关重要。因此，到目前为止，我们已经创建了“荧光腮腺小鼠”，重点是腮腺，这是癌症治疗中的问题，以及反映其功能的淀粉酶分泌。这项研究的目的是克服长期培养中唾液分泌能力下降的先前问题，并构建一种发光的腮腺培养系统，可以使用从荧光腮腺小鼠中分离出的腮腺细胞可视化和量化唾液腺的功能，并确定小鼠个体的辐射损害，从而确定salivare salivare gland gland Provestio noceant noceant noceant sancio noceant sancio noceant noceant noceant sanive and and and saniv and and sanive and sancio noceant noceant效应效应效应效应。今年，检查了生产辐射损伤模型小鼠的条件。所考虑的项目是1）实验中使用的小鼠的年龄和性别，2）X射线照射后X射线的强度，3）X射线照射后的育种天数，4）唾液腺组织损伤的程度，以及5）用于确定损伤的指标。结果，1）使用的小鼠是8周大的ICR女性。 2）当辐射的强度为10至30 Gy时，即使在10 Gy时也观察到唾液分泌和体重的降低。 3）X射线照射后要保留的天数为30天。即使用30 Gy辐照，也证实了30天后的小鼠生存。 4）迄今为止尚未严重观察到唾液腺组织损伤。 5）将来，我们将研究由组织免疫染色以及纤维化程度引起的凋亡和DNA损伤程度。