微量糞便DNAマーカーによる在来および外来野生動物の繁殖分布と感染生態の解明

利用微量粪便 DNA 标记阐明本土和外来野生动物的繁殖分布和感染生态学

基本信息

项目摘要

新興および再興感染症は野生動物由来であることが多い。しかし、これら野生動物が保有する各種病原体について、我々が把握しきれている微生物は限られる。我が国では在来および外来野生動物が激増しており、生態系への深刻な影響のみならず、多額の農作物被害が発生している。特に都市近郊に適応し繁殖する個体は、本来の野生型とは異なる生態を保持し、進化させていると考えられる。本研究では、これらの野生動物が保有する微生物および伝播状況を把握するため、個体を捕獲する必要が無く非侵襲的に採材できる糞便により、環境中で長期間生存可能である寄生虫を接触マーカーとして、ヒトを含む動物の感染症伝播のリスクアセスメントをマクロ的に実施する。本年度は、四国地方で捕獲された鳥類101検体を調査し、解析した。その結果、原虫類は20.8%,線虫類は8.9%の陽性率であった。また、西日本の都市近郊の野生動物、約150検体(計14目の動物)を採取し、検査に供した。その結果、線虫類は52.7%,原虫類は39.2%で陽性であり、より高頻度に寄生虫が検出された。この中で、ヌートリアからはヌートリア糞線虫と考えられる虫卵が高率に検出された。種を同定するために既報のプライマーによる遺伝子解析を試みたが、増副産物は得られなかった。そこで、糞便由来の虫卵検体でも種を同定できる新たなプライマーを設計し、各種条件検討を行った。その結果、少量の虫卵であっても高感度に増副産物を得られるPCRの系を構築できた。海外ではヌートリア糞線虫による人への感染も報告されており、今後、この鑑別法を用いて非侵襲性に採取できる糞便検体で調査を実施できると期待される。次年度も引き続き、野生個体の分布状況および人獣共通寄生性の病原体を含め直接および間接的な糞口感染の実態を明らかにする。
新出现和重新出现的传染病往往源自野生动物。然而,我们对这些野生动物携带的各种病原体的了解是有限的。在日本,本土和外来野生动物的数量正在迅速增加,不仅对生态系统造成严重影响,而且对农作物造成大量损害。特别是,适应城市地区并在城市附近繁殖的个体被认为维持和进化出与原始野生型不同的生态。在这项研究中,为了了解这些野生动物携带的微生物及其传播状况,我们将利用无需捕获个体即可非侵入性收集的粪便,来接触能够在环境中长期生存的寄生虫。以环境为标志,对包括人类在内的动物传播传染病进行宏观风险评估。今年,我们对在四国地区捕获的 101 个鸟类标本进行了调查和分析。结果,原虫阳性率为20.8%,线虫阳性率为8.9%。从日本西部城市郊区收集了约150个野生动物标本(共14个不同目)并提交进行检测。结果,寄生虫检出率更高,线虫阳性率为 52.7%,原生动物阳性率为 39.2%。其中,被认为是海狸鼠类圆线虫的卵在海狸鼠中检出率很高。尝试使用先前报道的引物进行遗传分析来鉴定物种,但没有获得扩增产物。因此,我们设计了新的引物,即使在粪便来源的鸡蛋样本中也可以识别该物种,并检查了各种条件。结果,我们构建了即使用少量的鸡蛋也能获得高灵敏度扩增产物的PCR系统。海外也有人类被海狸鼠类圆线虫感染的报道,希望未来能够利用这种区分方法非侵入性采集的粪便样本进行研究。明年,我们将继续摸清野生个体的分布情况,以及包括人畜共患病原体在内的直接和间接粪口感染的实际情况。

项目成果

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Detection of intestinal parasites in nutrias (Myocastor coypus) and molecular identification of Strongyloides myopotami from the eggs.
海狸鼠(Myocastor coypus)肠道寄生虫的检测以及卵中Strongyloides myopotami 的分子鉴定。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yuga Mori;Atsushi Naka;Ryosuke Koda;Yuzuru Ishizuka;Atsushi Hinenoya;Tomoyuki Shibahara;Kazumi Sasai;Makoto Matsubayashi.
  • 通讯作者:
    Makoto Matsubayashi.
高知県内で保護された野生鳥類の糞便検体による消化管寄生虫保有調査
使用高知县保护野生鸟类的粪便样本调查胃肠道寄生虫
  • DOI:
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    井上春奈;森 悠芽;畑中律敏;芝原友幸;笹井和美;松林 誠
  • 通讯作者:
    松林 誠
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
    辻 尚利

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