有機結合型トリチウムを用いた低濃度トリチウム影響解析

使用有机键合氚进行低浓度氚效应分析

基本信息

批准号：
21K12234
负责人：
鈴木正敏
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

トリチウム影響の中で特に科学的知見が不足している低濃度・持続処理に関する知見について、細胞内取り込みとDNA二重鎖切断の誘発をトリチウム水（HTO）と有機結合型トリチウム（OBT）で比較した。60-6,000 Bq/mLの範囲でHTOとOBTとしてトリチウム標識チミジン(3H-Thy)とパルミチン酸（3H-PA）をヒト正常上皮細胞であるRPE1-hTERTを培養する培地中に添加し、30日間の持続処理を行った。トリチウム処理期間中の累積分裂回数を指標にすると、6kBq/mLのHTO処理では顕著な細胞分裂回数の抑制は確認されず、同濃度で処理したOBTでは増殖抑制が3H-PA 、3H-Thyの順に抑制が強くなった。3H-Thyは処理開始5日後以降はほとんど細胞が増殖しなかったが、3H-PAは分裂回数の増加速度が遅くなるのみで30日後まで緩やかに上昇を続けた。トリチウム濃度を60 Bq/mLまで下げると累積分裂回数への影響は3H-Thyで若干の抑制が見られた以外は、未処理時と同等の分裂回数を示した。トリチウムの細胞内取り込みについて、トリチウム処理後の細胞を液体シンチレーションカウンタで測定すると、HTOは若干取り込んでいるが添加したほとんどが培地中で測定された。細胞内への取り込みは3H-Thy 、3H-PA の順に多くなった。トリチウム処理細胞から細胞核分画と細胞質分画のそれぞれを抽出して液体シンチレーションカウンタで測定すると、3H-Thyは細胞内に取り込んだトリチウムの約9割が細胞核に、3H-PAは約9割が細胞質に存在することが明らかとなった。特にOBTにおける細胞影響の予測において、トリチウムの取り込み量だけではなく細胞内局在が重要な要素となり、細胞内局在を考慮したトリチウム暴露による線量評価系の確立の必要性が示された。

针对科学知识尤其缺乏的氚对低浓度持续治疗的影响，我们比较了氚水（HTO）和有机结合氚（OBT）的细胞摄取和诱导DNA双链断裂的情况。做过。将氚标记的胸苷（3H-Thy）和棕榈酸（3H-PA）作为HTO和OBT添加到60-6,000 Bq/mL范围内的培养基中，用于培养RPE1-hTERT（人正常上皮细胞）30天进行连续处理。以氚处理期间累积的细胞分裂数为指标，6 kBq/mL的HTO处理对细胞分裂数没有明显的抑制，而相同浓度的OBT处理相比，观察到生长抑制。随着 3H-PA 和 3H-Thy 的抑制逐渐增强。使用3H-Thy，从治疗开始5天后，细胞几乎不再增殖，但使用3H-PA，分裂数量的增加速度仅减慢，并持续缓慢增加，直到30天后。当氚浓度降低至60 Bq/mL时，分裂数与未处理时相同，只是3H-Thy稍微抑制了对累积分裂数的影响。关于细胞内氚的摄取，当使用液体闪烁计数器测量氚处理后的细胞时，发现虽然一些HTO被摄取，但大部分添加量在培养基中被测量。细胞的摄取按照3H-Thy、3H-PA的顺序增加。当从氚处理的细胞中提取核和细胞质部分并使用液体闪烁计数器进行测量时，发现对于3H-Thy，大约90%进入细胞的氚被吸收到细胞核中，而对于3H-Thy，大约90%的氚被吸收到细胞核中。 -PA，大约90%被吸收到细胞核中，表明它存在于细胞质中。特别是，在预测OBT中的细胞效应时，不仅氚摄取量而且细胞内定位也是重要因素，这表明需要建立考虑细胞内定位的基于氚暴露的剂量评估系统。