急性相蛋白質オロソムコイドによる蛋白尿抑制の分子基盤解明と慢性腎臓病治療への応用

阐明急性期蛋白类粘蛋白抑制蛋白尿的分子基础及其在慢性肾脏病治疗中的应用

基本信息

批准号：
21K19340
负责人：
渡邊博志
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-07-09 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19340/
关键词：
オロソムコイド AGP 糸球体バリア orosomucoid 腎病態慢性腎臓病蛋白尿腎炎症

项目摘要

本年度は糸球体内皮バリア機能に対するAGPの保護効果を検討した。具体的には、AGPの糸球体バリア機能における内因性AGPの寄与を明らかにすべく、WT及びAGP KOの長期飼育を行なった。その結果、WTとAGP KOの間に生存率、体重、アルブミン尿、血圧、ネフリン発現に差はなく、腎組織学的評価においても変化は観察されなかった。よって、内因性AGPは健常状態 (若年齢-中年齢) において糸球体バリア機能への影響は少ないことが示唆された。そこで、アドリアマイシン（ADR）抵抗性であるC57BL/6系統マウスに対してADRを投与した結果、WTではアルブミン尿が生じなかったのに対し、AGP KOにおいてはADR投与7日後からアルブミン尿の上昇傾向が示され、ネフリン発現はWTと比較し有意に低下した。さらに、ADR投与21日後においては、WT+ADR群と比較し、AGP KO+ADR群で有意なアルブミン尿の上昇が観察された。この時、F4/80免疫染色、炎症性サイトカイン、CD163発現はWT+ADR、AGP KO+ADR群で変化は見られなかった。加えて、ADR投与21日後においてWT+ADR群及びAGP KO+ADR群ともに健常WTと比較し有意に糸球体ネフリン発現が減少した。これらの結果より、AGP KO+ADR群でアルブミン尿が上昇した機序には、炎症とネフリン発現は関与していない可能性が示唆された。そこで、糸球体中AGP局在を評価した結果、WT+ADR群ではAGP KO+ADR群と異なり糸球体にAGPの存在が認められた。すなわち、AGPは糸球体保護的に働くことが示された。従って、内因性AGPは健常状態では寄与が少ないものの、糸球体障害時には糸球体保護的に働き、アルブミン尿抑制作用を有することを明らかにした。

今年，我们研究了 AGP 对肾小球内皮屏障功能的保护作用。具体来说，为了阐明内源性AGP对AGP肾小球屏障功能的贡献，我们对WT和AGP KO进行了长期饲养。结果，WT和AGP KO之间的存活率、体重、蛋白尿、血压或去氧肾上腺素表达没有差异，并且肾脏组织学评估没有观察到变化。因此，有人认为，在健康状况下（青年至中年），内源性AGP对肾小球屏障功能影响不大。因此，对阿霉素(ADR)具有抗性的C57BL/6品系小鼠给予ADR后，WT小鼠中未出现白蛋白尿，而AGP KO小鼠中的白蛋白尿从给予ADR后7天开始有增加的趋势。，与 WT 相比，nephrin 表达显着降低。此外，ADR施用后21天，与WT+ADR组相比，在AGP KO+ADR组中观察到白蛋白尿显着增加。此时，WT+ADR组和AGP KO+ADR组中F4/80免疫染色、炎性细胞因子和CD163表达没有观察到变化。此外，ADR给药后21天，与健康WT相比，WT+ADR组和AGP KO+ADR组的肾小球去氧肾上腺素表达均显着降低。这些结果表明炎症和去氧肾上腺素表达可能不参与AGP KO+ADR组蛋白尿增加的机制。因此，作为评估AGP在肾小球中的定位的结果，与AGP KO+ADR组不同，在WT+ADR组中观察到AGP在肾小球中的存在。换句话说，AGP 显示出以肾小球保护的方式发挥作用。因此，尽管内源性AGP在正常情况下贡献很小，但已表明它在肾小球疾病期间以肾小球保护方式发挥作用并抑制白蛋白尿。