転写因子ＨＩＦ－１αによる肺癌での癌幹細胞維持機構の解析および治療法の開発

转录因子HIF-1α对肺癌干细胞维持机制的分析及治疗方法的开发

• 批准号: 18J40105
• 负责人: 岩渕(吉田) 千里
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-25 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J40105/
• 关键词: 肺がん; 癌幹細胞; HIF-1a; ゲフィチニブ

本研究課題は肺がんにおける薬剤耐性獲得機構の解析および癌幹細胞の治療法の開発を目指し行ってきた。採用最終年度ではヌードマウスを用いた治療実験の成果を中心に報告する。まず、投薬する薬剤にはHIF-1αの分解を促進するオートファジー活性化剤を使用した。in vitroの実験系において3種のオートファジー活性化剤を使用し、mRNAの変化や細胞増殖阻害試験などを行い投薬する薬剤の評価を行った。それぞれのオートファジー活性化剤で処理した細胞ではHIF-1αの分解が促進し、Oct3/4、NanogといったEMT関連遺伝子のmRNAレベルが抑制されていた。さらに、オートファジー活性化剤で処理した細胞は癌幹細胞の数も有意に減少しており、癌幹細胞の治療薬としての可能性が示唆された。gefitinibとの併用での細胞増殖試験では１種類のオートファジー活性化剤(17-AAG)が効果的な結果を示した。そこで、ヌードマウスに皮下腫瘍を作製し、その後、gefitinibを30mg/kgで週5日間投与を行った。投与３週間までは腫瘍の縮小が見られるが、それ以降は腫瘍の再増殖が起こり始めた。再増殖が見られた個体についてはgefitinibと併用して17-AAGを50mg/kg 週2回投与を3週間行なった。その結果、17-AAGを併用投与した群ではgefitinib単剤投与群と比べ有意に腫瘍の再増殖が抑えられる結果となった。さらに再増殖した腫瘍を摘出し腫瘍内での変化を調べるとOct3/4, Nanogのタンパクレベルでの発現が低下していることが明らかとなった。この結果から、再発した肺がんにおいて17-AAGが効果的に増殖抑制を示すことが示唆された。

该研究主题旨在分析肺癌中耐药性获取的机制，并开发癌症干细胞的治疗方法。在招募的最后一年，我们将主要报告使用裸鼠的治疗实验结果。首先，将促进HIF-1α降解的自噬激活剂用作要施用的药物。在体外实验系统中使用了三种类型的自噬活化剂，并使用mRNA变化和细胞生长抑制测试评估了要施用的药物。用各自的自噬激活剂处理的细胞促进了HIF-1α的降解，并且抑制了EMT相关基因的mRNA水平，例如Oct3/4和Nanog。此外，用自噬活化剂处理的细胞中癌症干细胞的数量显着降低，这表明它可能是癌症干细胞的治疗剂的可能性。在与吉非替尼结合使用的细胞增殖研究中，一种自噬激活剂（17-AAG）显示出有效的结果。然后在裸小鼠中产生皮下肿瘤，然后以30 mg/kg的速度施用吉非替尼，每周五天。观察到肿瘤收缩长达三周，但在那之后，肿瘤重新生长开始发生。每周两次以50 mg/kg的速度给予养育患者，与吉非替尼结合使用3周。结果，与单独用吉非替尼治疗的组相比，用17-AAG给药的组中肿瘤重长显着抑制。此外，除去重长的肿瘤并检查了肿瘤内的变化，并发现OCT3/4的表达和纳米蛋白水平降低。这些结果表明，17-AAG有效地抑制了复发性肺癌的生长。