心肥大、心不全における非コードＲＮＡの機能解析

非编码RNA在心脏肥大和心力衰竭中的功能分析

• 批准号: 18J20214
• 负责人: 辻 修平
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-25 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J20214/
• 关键词: 長鎖非コードRNA; 心肥大; 心不全; 非コードRNA

心肥大・心不全に関わる長鎖非コードRNAとしてLionheartを新規に同定した。Lionheart-KOマウスを作成したところ、TAC手術後に心機能が低下することが明らかになった。lncRNAはcisもしくはtransに働くことが知られているが、Lionheartの近傍遺伝子はWTとKOマウスで発現量に変化はなかった。そのためLionheartはtransに働くことが想定された。Lionheartと結合するタンパク質を同定するためRNA pull down assayを行った結果、Lionheartが最も特異的に発現するタンパク質としてPURAが同定された。PURAはMYH6のPNR elementと結合することでその発現を負に制御することがしられている。MYH6は出生後発現量が増加するが、加齢や心不全を呈すると発現が低下する。また、MYH6のヘテロマウスでは拡張型心筋症様の心機能低下を呈することも知られている。Lionheart-KOマウスではTAC手術後に心機能が低下しており、またMYH6の発現量がmRNAレベル、proteinレベルで低下していた。免疫沈降の結果、Lionheart-KOマウスではWTと比較し、PURAとMYH6の結合が多いことが分かった。RNA-EMSAの実験ではLionhertとPURAの結合力はPURAとMYH6の結合力よりも強いことが分かった。また、Lionheart-KOマウスにアデノ随伴ウイルスを用いて後天的にLionheartを発現させると心機能が改善することも明らかになり、LionheartはPURAと結合することでPURAとMYH6の結合を阻害し、結果としてMYH6の発現が上昇し、心機能低下を緩和する働きがあることを明らかにした。

Lionheart新近被识别为一种长链的非编码RNA，参与心脏肥大和心力衰竭。创建了Lionheart-KO小鼠，并揭示了TAC手术后心脏功能降低。尽管已知lncrna作用于顺式或反式，但狮子心周围的基因在WT和KO小鼠中没有改变表达水平。因此，假定Lionheart将在Trans上工作。为了鉴定与狮子心结合的蛋白质，进行了RNA下拉测定，并将PURA鉴定为最具体表达Lionheart的蛋白质。据说Pura通过与MYH6的PNR元素结合来负调节其表达。 MYH6以产后增加表示，但是当发生衰老或心力衰竭时，其表达降低。众所周知，MYH6杂粒表现出扩张的心肌病变心脏功能。 TAC手术后，Lionheart-KO小鼠的心脏功能降低，在mRNA和蛋白质水平下，MYH6表达水平也降低。免疫沉淀表明与WT相比，Lionheart-Ko小鼠在Pura和MyH6之间具有更大的结合。在RNA-EMSA实验中，发现Lionhert和Pura之间的结合强度比Pura和MyH6之间的结合强度强。还揭示了当Lionheart-ko小鼠通过使用腺相关病毒表达Lionheart时获得Lionheart-KO小鼠时，心脏功能得到改善，而Lionheart与Pura结合，抑制了Pura和MyH6的结合，从而减少了心脏下降的MYH6表达。

项目成果

Long Intergenic Noncoding RNA, Lionheart, Regulates Heart Size and Contributes to the Protection from Pressure Overload Induced Heart Failure

长基因间非编码 RNA，Lionheart，调节心脏大小并有助于防止压力过载引起的心力衰竭

• 发表时间: 2021
• 作者: Kuwabara Y;Tsuji S;Nishiga M;Izuhara M;Ito S;Nagao K;Horie T;Watanabe S;Koyama S;Kiryu H;Nakashima Y;Baba O;Nakao T;Nishino T;Sowa N;Miyasaka Y;Hatani T;Ide Y;Nakazeki F;Kimura M;Yoshida Y;Inada T;Kimura T;Ono K.;Shuhei Tsuji
• 通讯作者: Shuhei Tsuji

Long Intergenic Noncoding RNA, Lionheart, Prevents Cardiac Dysfunction Induced by Pressure Overload via Regulating Myosin Heavy Chain 6

长基因间非编码 RNA，Lionheart，通过调节肌球蛋白重链 6 预防压力过载引起的心脏功能障碍

• 发表时间: 2020
• 作者: Kuwabara Y;Tsuji S;Nishiga M;Izuhara M;Ito S;Nagao K;Horie T;Watanabe S;Koyama S;Kiryu H;Nakashima Y;Baba O;Nakao T;Nishino T;Sowa N;Miyasaka Y;Hatani T;Ide Y;Nakazeki F;Kimura M;Yoshida Y;Inada T;Kimura T;Ono K.;Shuhei Tsuji;辻修平
• 通讯作者: 辻修平

A novel long intergenic noncoding RNA, Lionheart, regulates myosin heavy chain 6 in pressure overload induced heart failure.

一种新型长基因间非编码 RNA，Lionheart，在压力超负荷引起的心力衰竭中调节肌球蛋白重链 6。

• 发表时间: 2019
• 作者: Kuwabara Y;Tsuji S;Nishiga M;Izuhara M;Ito S;Nagao K;Horie T;Watanabe S;Koyama S;Kiryu H;Nakashima Y;Baba O;Nakao T;Nishino T;Sowa N;Miyasaka Y;Hatani T;Ide Y;Nakazeki F;Kimura M;Yoshida Y;Inada T;Kimura T;Ono K.;Shuhei Tsuji;辻修平;辻修平
• 通讯作者: 辻修平

A Novel Long Intergenic Noncoding RNA, Lionheart, Protects the Heart from Pressure Overload

一种新型长基因间非编码 RNA，Lionheart，可保护心脏免受压力过载

• 发表时间: 2018
• 作者: 尾野 亘