甲状腺ホルモンとリガンドの結合におけるハロゲン原子の受容体結合力増強機構の解明

阐明卤素原子增强甲状腺激素与配体结合中受体结合力的机制

基本信息

批准号：
18J11638
负责人：
袈裟丸仁志
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

甲状腺ホルモン受容体(TRs)は、全身の細胞に発現し、トリヨードチロニン(T3)やチロキシン(T4)が結合することで活性化し、細胞の代謝を向上させる。TRの内在性リガンドであるT4は、分子中に4つのヨウ素原子を持つが、チロキシン類縁体のホルモン活性はヨウ素の位置や数に依存すること、ヨウ素を持たないチロニンはTRに対して活性を示さないことが報告されている。本研究の目的は、TRとT4をはじめとするTR結合性リガンドとの間の結合におけるハロゲン原子の寄与を解明し、チロニン誘導体の受容体結合機構の解明と定量的な化学物質の核内受容体結合性予測法の確立を目指すことである。本年度は、取り扱いに専用の施設が必要となる放射標識化合物を用いた試験に替わる蛍光標識化合物による試験系の確立と、それを用いたTR結合性リガンドの結合性評価を試みた。その結果、初めに、定量的な化学物質の受容体結合性を評価するのに用いる蛍光リガンドT4-C6-NBDの合成し、合成したリガンドを用いての結合試験系の確立、さらにハロゲン含有化合物の結合性評価を達成した。このことは、取扱に制限のある放射標識リガンドを用いることなく、一般の実験室においても簡便かつ高感度な結合競争試験を実施可能とするため、今後のTRsに関する研究を飛躍的に進展させることが期待される。さらに、確立した結合試験系を用いることで、臭素4置換BPA（TBBPA）やヨウ素4置換BPA（TIBPA）がTRに非常に強く結合することを明らかとした。このことは、TRsへのリガンドの結合には芳香環オルト位に対し臭素原子やヨウ素原子といった大きな置換基が必要であることを明らかとし、また、ヨウ素原子以外の置換によって結合性がさらに増強されるという化学物質リスクに関する有益な知見が得られたと考えられた。

甲状腺激素受体（TRS）在整个身体的细胞中表达，通过结合三曲霉蛋白（T3）和甲状腺素（T4）激活，并改善细胞代谢。 T4是TR的内部配体，在分子中具有四个碘场，但是Tyroxine边缘的荷尔蒙活性取决于碘的位置和数量，并且没有碘的泰罗蛋白会激活TR。显示。这项研究的目的是阐明卤素原子在TR和T4和其他TR结合配体之间的结合中的贡献，阐明他酰衍生剂受体议程和定量化学物质的接受。今年，我们试图使用荧光标志化合物来建立一个测试系统，该化合物使用X光摄影化合物替代测试，该化合物需要专用的设备来处理，并使用它评估TR结合配体的结合。结果，首先，用于评估化学物质的定量受体键合的荧光配体T4-C6-NBD的合成，使用合成配体建立了绑定的测试系统，并实现了含卤素的化合物。这是为了促进对未来TR的研究，以便在不使用限制的无线电标志配体的情况下，在普通实验室中合并了竞争。此外，据揭示了使用已建立的TIE测试系统与TR结合到TR的结合。这表明与TR的配体结合需要大的取代基，例如芳香环或碘原子等大型取代基，并且通过碘原子以外的其他替代品进一步增强了结合。获得。