H2亜型インフルエンザウイルスの宿主間伝播機序の解明

H2流感病毒宿主间传播机制的阐明

• 批准号: 17J04805
• 负责人: 鈴木 瑞穂
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J04805/
• 关键词: インフルエンザウイルス; ブタ; レセプター特異性; H2亜型

H2亜型のインフルエンザウイルスは、1968年以降ヒトでの流行例がなく、多くのヒトがH2亜型ウイルスに対する獲得免疫を持たないことから、ヒトで再び流行した場合にはパンデミックとなる可能性が高い。一方、インフルエンザウイルスの自然宿主である野生水禽からは現在もH2亜型ウイルスが分離され、将来的にヒトへ伝播する可能性が考えられる。インフルエンザウイルスのレセプターはシアル酸を含む糖であり、末端構造の違いから鳥型とヒト型の2種類が存在する。現在野鳥で循環しているH2亜型ウイルスがヒトで流行するには、ウイルス表面糖タンパクであるヘマグルチニン(HA)のレセプター特異性が鳥型からヒト型へ変化する必要がある。我々は先行研究をもと、H2亜型ウイルスをブタに接種し継代すると、ヒト型レセプター特異性を示すウイルスが選択されると考えた。本研究ではA/duck/Hong Kong/278/1978 (H2N9)をブタの鼻腔内に接種し５代継代し、鼻腔スワブから子孫ウイルスを継時的に分離した。子孫ウイルスのレセプター特異性を、鳥型もしくはヒト型レセプターを模した糖鎖ポリマーを抗原としたELISA法で評価したところ、子孫ウイルスは、継代前のウイルスと同様に鳥型のレセプターにより強く結合した。また、HAタンパクの遺伝子（HA遺伝子）のアミノ酸配列を調べ継代前のウイルスと比較したところ、子孫ウイルスのHA遺伝子には3箇所のアミノ酸置換を認めた。これらの置換部位はレセプターとの結合部位や、レセプター特異性に係わることが明らかとなっているアミノ酸とは異なる位置に存在しており、その意義は今のところ不明である。以上から、今後５代目の継代で分離されたウイルスをさらにブタで継代し、ヒト型レセプター特異性のウイルスが選択されるか調べる必要があると考える。

H2亚型流感病毒自1968年以来就没有在人类中流行，而且许多人对H2亚型病毒没有获得免疫力，因此如果它们再次在人类中流行，就有可能成为大流行病。另一方面，H2亚型病毒仍在从野生水禽中分离出来，野生水禽是流感病毒的天然宿主，未来有可能传播给人类。流感病毒受体是含有唾液酸的糖类，根据末端结构的差异，有禽类和人类两种。目前在野生鸟类中传播的 H2 病毒要在人类中流行，血凝素 (HA)（一种病毒表面糖蛋白）的受体特异性必须从禽类到人类发生变化。根据之前的研究，我们认为当猪接种H2亚型病毒并传代时，会选择表现出人型受体特异性的病毒。在这项研究中，A/duck/Hong Kong/278/1978（H2N9）被接种到猪的鼻腔中，传代5代，随着时间的推移，从鼻拭子中分离出后代病毒。当使用模仿禽类或人类受体的糖链聚合物作为抗原通过ELISA评估子代病毒的受体特异性时，子代病毒与传代前的病毒一样，与禽类受体的结合更加牢固。此外，当检查HA蛋白基因(HA基因)的氨基酸序列并与传代前的病毒的氨基酸序列进行比较时，在子代病毒的HA基因中发现了3个氨基酸取代。这些取代位点位于与受体结合位点和已知参与受体特异性的氨基酸不同的位置，其意义目前尚不清楚。综上所述，我们认为有必要对猪第五代分离的病毒进行进一步钝化，并研究是否选择具有人型受体特异性的病毒。

项目成果

Study on the pandemic potential of H2 influenza viruses and the vaccine preparation for humans

H2流感病毒大流行潜力及人用疫苗制剂研究

• 发表时间: 2017
• 作者: Suzuki M;Okamatsu M;Matsuno K;Sakoda Y
• 通讯作者: Sakoda Y