Investigation of the folding dynamics of proteins based on the advanced method of single molecule detection

基于先进的单分子检测方法研究蛋白质折叠动力学

• 批准号: 21370072
• 负责人: TAKAHASHI Satoshi
• 金额: $ 12.06万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21370072/
• 关键词: フォールディング; 蛋白質; 折り畳み; ダイナミクス; 一分子検出; タンパク質; 一分子蛍光観察; 時系列データ; ラインフォーカス共焦点顕微鏡; 一分子観察; タンパク質の折り畳み; 蛍光測定装置; シトクロムc; β-ラクトグロブリン; マイクロ加工技術

In this project, we first developed spherical mirror system for the detection of fluorescence from single molecules for long periods. Based on the developed system, we successfully determined the energy landscape for cytochrome c. We next developed line conforcal microscopy for the fast time resolved measurements of single molecule fluorescence time series. The method was used to investigate the unfolded state dynamics of the B domain of protein A, and revealed the presence of substates in the unfolded ensemble. Further applications of the developed methods for other protein systems are currently underway.

在这个项目中，我们首先开发了球面镜系统，用于长时间检测单分子的荧光。基于开发的系统，我们成功确定了细胞色素 c 的能量格局。接下来，我们开发了线共聚焦显微镜，用于单分子荧光时间序列的快速时间分辨测量。该方法用于研究蛋白质 A B 结构域的展开状态动力学，并揭示了展开整体中亚状态的存在。目前正在将已开发的方法进一步应用于其他蛋白质系统。

项目成果

一分子測定法による蛋白質の折り畳み研究の展開

利用单分子测量方法进行蛋白质折叠研究的进展

• 发表时间: 2009
• 作者: 鎌形清人・木下雅仁・高橋聡

Exploring The Energy Landscape of Denatured Protein Using Time-Series Detection of Fluorescence of Free Single Molecules

利用自由单分子荧光的时间序列检测探索变性蛋白质的能量景观

• 发表时间: 2012
• 作者: Kiyoto Kamagata; Toshifumi Kawaguchi; Akinori Baba; Yoshihiro Sambongi; Tamiki Komatsuzaki; Satoshi Takahashi
• 通讯作者: Satoshi Takahashi

Microsecond-resolved time traces of protein conformational change by single-molecule fluorescence detection

通过单分子荧光检测微秒分辨率的蛋白质构象变化时间轨迹

• 发表时间: 2011
• 作者: Hiroyuki Oikawa; Kiyoto Kamagata; Issei Iijima; Takahiro Hohsaka; Yoshihiro Sambongi; Satoshi Takahashi
• 通讯作者: Satoshi Takahashi

Single molecule and ensemble investigations of protein folding dynamics in the time domain from 30 μs to seconds

30 μs 至秒时域内蛋白质折叠动力学的单分子和整体研究

• 发表时间: 2011
• 作者: Satoshi Takahashi

Imaging and tracking of single BLG molecules in solution

溶液中单个 BLG 分子的成像和跟踪

• 发表时间: 2011
• 作者: Shion Ando; Hiroyuki Oikawa; Kiyoto Kamagata; Kazumasa Sakurai; Yuji Goto; Satoshi Takahashi
• 通讯作者: Satoshi Takahashi