消化管間質腫瘍特異的画像診断のための抗c-kit抗体プローブ開発の試み

尝试开发用于胃肠道间质瘤特异性影像诊断的抗C-kit抗体探针

基本信息

批准号：
20659212
负责人：
曽川千鶴
金额：
$ 2.05万
依托单位：
National Institute of Radiological Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20659212/
关键词：
抗体画像診断

项目摘要

特定のガンに対する治療の効果判定や予後のフォローアップには、それぞれのガンに特異的な画像診断プローブの開発が期待される。GIST細胞は多くがc-kitを高発現しており、抗c-kit抗体を画像診断プローブとして利用できればGIST患者の診断への貢献が大きく期待される。そこで本研究では抗c-kit抗体のプローブ化を試みた。昨年度までに、モノクローナル抗体(IgG)を用いた基礎検討を終了し、画像診断プローブとして利用可能な抗c-kitモノクローナル抗体を選出、担ガンマウスを用いた放射標識IgGの体内動態での腫瘍への高集積をみとめ、SPECTイメージングによる大腿部への移植腫瘍の画像化に成功し論文報告した。昨年までの研究結果から、IgGは血液、肺、肝臓、腎臓への生理的集積が高く、1グラムあたりの放射能集積量は腫瘍より低いものの、イメージング上は肺や肝臓への集積が目立つ結果となり、それらの生理的集積の低減が必須と考えられた。そこで本年度は、臨床応用へ向けた抗体の低分子量化を試みanti-c-kit-antibody-Fabを用いてIgGと同様の基礎研究をおこなった。放射標識-Fabを細胞で評価した結果、結合率がIgGよりも劣り、非標識抗体を加えた競合阻害実験から求めた結合親和性もIgGより低下した。細胞での局在を継時的に調べたところ、放射標識抗体は内在化画分も認められるものの、早期に細胞膜から乖離する画分が多いことも明らかとなった。担ガンマウスでの体内動態の結果、腎臓への集積が圧倒的に高くなったが、血中クリアランスは非常に早く高い腫瘍/血液比を得ることができた。anti-c-kit-antibody-Fabプローブは、c-kit高発現タイプの小細胞性肺癌イメージングにも展開した。今後はGISTをはじめとする腫瘍への分子標的内照射療法への応用が期待できる結果となった。

针对每种癌症的成像诊断探针的开发预计将用于确定特定癌症治疗的有效性并跟踪预后。许多GIST细胞高表达c-kit，使用抗c-kit抗体作为影像诊断探针有望极大有助于GIST患者的诊断。因此，在本研究中，我们尝试使用抗C-kit抗体作为探针。到去年，我们已经完成了使用单克隆抗体（IgG）的基础研究，选择了一种可以用作影像诊断探针的抗C-kit单克隆抗体，并在观察后研究了放射性标记的IgG在荷瘤小鼠体内的药代动力学。由于大量积累，我们成功地利用 SPECT 成像对移植到大腿的肿瘤进行了成像，并在一篇论文中报道了这一点。截至去年的研究结果表明，IgG在血液、肺、肝、肾中具有较高的生理蓄积量，虽然每克蓄积的放射性量低于肿瘤中的放射性量，但在肺、肝中的蓄积量却很明显因此，减少其生理积累被认为是至关重要的。因此，今年我们利用抗c-kit-抗体-Fab进行了类似IgG的基础研究，试图降低抗体的分子量用于临床应用。对细胞内的放射性标记Fab进行评价的结果是，其结合率比IgG差，并且通过添加未标记抗体的竞争性抑制实验测定的结合亲和力也比IgG低。当随着时间的推移研究细胞中的定位时，发现尽管观察到放射性标记抗体的一些内化部分，但许多部分在早期就从细胞膜解离。荷瘤小鼠体内的药代动力学结果显示，肾脏中的蓄积量极高，但血液中的清除速度非常快，并且可以获得很高的肿瘤/血液比率。抗 c-kit-抗体-Fab 探针还用于对小细胞肺癌（一种 c-kit 高表达的癌症）进行成像。该结果有望在未来应用于胃肠道间质瘤等肿瘤的分子靶向内部放射治疗中。